Isolasi Promotor Gen Beta-actin (β-actin) Ikan Gurami (Osphronemus gouramy Lac.)

Winaris, Nuning. 2009. Isolasi Promotor Gen Beta-actin (β-actin) Ikan Gurami(Osphronemus gouramy Lac.). Skripsi, Jurusan Biologi UniversitasNegeri Malang. Pembimbing : (I) Dra. Dwi Listyorini, M.Si, D.Sc, (II)Dr. Endang Suarsini, M.Ked.Kata-kata kunci : ikan gurami, promotor gen beta-actin (β-actin)Ikan gurami (Osphronemus gouramy Lac.) merupakan salah satu ikan yangmemiliki tingkat konsumsi tinggi. Namun, pertumbuhan ikan gurami relatif lebihlambat dari pada spesies ikan air tawar lainnya. Untuk mencapai bobot konsumsi(kurang lebih 700 g) dibutuhkan waktu sekitar 3 tahun. Umur ikan gurami sendiridapat mencapai 10 tahun. Promotor gen β-actin telah diisolasi dari beberapa jenisikan dan dilaporkan sebagai regulator dengan aktivitas tinggi dalam mengaturekspresi transgen pada ikan transgenik. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasipromotor gen β-actin ikan gurami dengan harapan selanjutnya dapat dimanfaatkandalam penerapan rekayasa genetika untuk perbaikan dan pengembangan kualitasikan gurami, khususnya di dalam negeri.Penelitian ini adalah penelitian deskriptif eksploratif untuk mencari sekuenpromotor β-actin ikan gurami. Sekuen promotor gen β-actin ikan gurami diisolasidengan menggunakan metode amplifikasi PCR dengan primer yang dirancangberdasarkan primer yang digunakan untuk isolasi β-actin ikan nila, dengan acuangen β-actin dari ikan common carp dan Japanese medaka (Hwang, dkk., 2002).Primer forward yang digunakan adalah 5'-CCGCGGGTGWGTGACGCTGGACCAATC-‘3 dan reverse 5'-CCATGTCATCCCAGTTGGTCACAA-‘3.Dari hasil sequencing diketahui bahwa dengan sepasang primer ternyatabelum mampu mengisolasi seluruh sekuen gen β-actin ikan gurami secara utuh,selain itu masih banyak bagian dari sekuen forward dan reverse yang mengalamierror reading. Hasil analisis menunjukkan bahwa sekuen hasil amplifikasi PCRmerupakan bagian dari gen β-actin ikan gurami (Osphronemus gouramy Lac.).Melalui analisis lebih lanjut diduga terdapat sekuen promotor pada ujung danpangkal hasil amplifikasi dengan primer forward dan reverse. Masih diperlukanamplifikasi PCR dengan menggunakan primer-primer internal untuk memperolehsekuen promotor β-actin yang utuh