Validasi Metode Analisis Etil p-metoksisinamat dalam Plasma secara In Vitro menggunakan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)

Etil p-metoksisinamat (EPMS) merupakan salah satu metabolit sekunder yang terdapat pada tanaman kencur (Kaempferia galanga. L) dari family Zingiberaceae. Senyawa ini memiliki aktivitas farmakologinya sebagai antiinflamasi dan analgesik. Tujuan penelitian ini adalah memperoleh optimasi kondisi analisis dan metode yang tervalidasi untuk analisis EPMS dalam plasma secara in vitro menggunakan KCKT dengan Diode Array Detector (DAD). EPMS diekstraksi dari plasma dengan metode pengendapan protein menggunakan metanol. Metanol dimasukkan ke dalam plasma dengan perbandingan 4:1 kemudian divortex selama 20 detik, dan disentrifugasi pada kecepatan 3000 rpm selama 10 menit. Analisis dilakukan dengan isokratik pada kolom C18 fase terbalik Acclaim® Polar Advantage II (4,6 x 150 mm, 3μm) dan fase gerak metanol-aquabidestilata (60:40v/v) pada laju alir 1,0 mL/menit. Deteksi dilakukan pada panjang gelombang 308 nm dan volume penyuntikan 20 μL. Pada rentang konsentrasi 2,02-40,4 μg/mL dihasilkan kurva kalibrasi yang linier dengan koefesien korelasi (r) sebesar 0,9989. Nilai %diff akurasi metode ini berada diantara -12,4507% dan 10,5212% dengan nilai presisi (KV) antara 0,1417% dan 7,5913% serta uji perolehan kembali antara 87,5493% dan 110,5212%