Evaluation of XPC c.2815A>C polymorphism in risk, clinicopathological aspects and prognosis of oropharyngeal squamous cell carcinoma

Orientador: Carmen Silvia Passos LimaTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências MédicasResumo: As diferenças individuais geradas por polimorfismos de base única (SNPs) em genes que atuam no mecanismo de reparo de DNA indicam que a constituição genética pode predispor indivíduos ao carcinoma de células escamosas (CCE) de orofaringe (OF) e influenciar no prognóstico de pacientes portadores do tumor. Até onde atinge o nosso conhecimento, o papel dos genótipos do SNP c.2815A>C no gene XPC em CCEOF ainda é incerto e necessita de estudos adicionais. Frente ao exposto, os objetivos do estudo foram os de verificar se os genótipos do referido SNP influenciam o risco de ocorrência e os aspectos clínicopatológicos do CCEOF, assim como o prognóstico dos pacientes portadores do tumor e a expressão do gene XPC. Foram avaliados 250 pacientes com CCEOF e 250 controles. O DNA genômico foi obtido das amostras de leucócitos do sangue periférico dos pacientes e dos controles inseridos no estudo. Os genótipos do SNP XPC c.2815A>C foram identificados pela técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real. O RNA foi obtido das amostras de leucócitos de sangue periférico dos controles inseridos no estudo. A expressão gênica foi avaliada pela técnica de PCR quantitativa. As diferenças entre os grupos foram avaliadas pelos testes da probabilidade exata de Fisher ou qui-quadrado, regressão logística múltipla, Kaplan-Meier, log-rank, análises univariada e multivariada de Cox e Mann-Whitney. Observamos que a frequência do genótipo XPC c.2815AA foi maior em pacientes com CCEOF do que em controles (42,4% versus 30,8%, P= 0,02). Indivíduos portadores deste genótipo tiveram 2,10 mais chances de desenvolver a doença do que os demais. Os genótipos XPC c.2815AA ou AC também foram mais frequentes em pacientes com metástase cervical volumosa (N2 ou N3) do que nos demais (92,6% versus 84,1%, P= 0,04). Notamos que os pacientes com CCE de parede anterior de OF com tumor localmente avançado (T3 ou T4) e com o genótipo XPC c.2815AA tiveram menores sobrevidas livre de eventos (21,2% versus 42,2%, P= 0,04) e global (16,3% versus 28,6%, P= 0,02) do que os outros. Indivíduos com os genótipos XPC c.2815AA ou AC apresentaram maior expressão do gene XPC do que os demais [1,78 unidade arbitrária (UA) versus 1,34 UA, P= 0,04]. Nosso estudo sugere, pela primeira vez, que o SNP XPC c.2815A>C influenciou o risco de ocorrência do CCEOF, a agressividade da doença, o prognóstico dos pacientes e a modulação da expressão gênicaAbstract: Individual differences generated by single nucleotide polymorphisms (SNPs) in genes that act on the DNA repair mechanisms indicate that the genetic constitution may predispose individuals to oropharyngeal (OP) squamous cell carcinoma (SCC) and influence the prognosis of patients with the tumor. To the best of our knowledge, the role of c.2815A>C SNP genotypes in XPC gene of OPSCC is still uncertain and needs additional studies. Thus, the present study aimed to verify whether the SNP genotypes influence the risk of occurrence and clinicopathological aspects of OPSCC, as well as the prognosis of patients with tumor and the XPC gene expression. We evaluated 250 OPSCC patients and 250 controls. The genomic DNA was obtained from peripheral blood leukocyte samples from patients and controls entered into the study. The XPC c.2815A>C SNP genotypes were identified by real-time polymerase chain reaction (PCR). The RNA was obtained from peripheral blood leukocyte samples from controls inserted into the study. The gene expression was evaluated by quantitative PCR. Differences between groups were assessed using the Fisher exact or chi-square test, multiple logistic regression, Kaplan-Meier, log-rank, univariate and multivariate Cox analyzes and Mann-Whitney. We observed that the frequency of XPC c.2815AA SNP genotype was more common in OPSCC patients than in controls (42.4% versus 30.8%, P= 0.02). Individuals with this genotype were under 2.10 increased chances of OPSCC than the others. The XPC c.2815AA or AC SNP genotypes were more frequent in patients with advanced cervical metastasis (N2 or N3) than others (92.6% versus 84.1%, P= 0.04). We noted that patients with SCC of anterior wall of the OP with locally advanced tumors (T3 or T4) and carriers of the XPC c.2815AA SNP genotype had lower event-free (21.2% versus 42.2%, P= 0.04) and overall (16.3% versus 28.6%, P= 0.02) survivals than others. Individuals with the XPC c.2815AA or AC SNP genotypes presented higher XPC gene expression than others [1.78 arbitrary unit (AU) versus 1.34 AU, P= 0.04]. Our study suggest, for the first time, that the XPC c.2815A>C SNP influenced the risk of OPSCC, the aggressiveness of disease, the prognosis of patients and the modulation of gene expressionDoutoradoFisiopatologia MédicaDoutora em CiênciasCAPE