Effect of platelet rich plasma associated or not to suture on severe muscle injury repair of rats

Orientadores: William Dias Belangero, José Carlos Silva Camargo FilhoDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências MédicasResumo: Introdução: As lesões musculares são divididas em leves, moderadas e graves conforme a quantidade de fibras rompidas. O tratamento padrão para lesões graves é a sutura das bordas do tecido muscular rompido. A aplicação local do Plasma Rico em Plaquetas (PRP) vem sendo considerada uma alternativa de tratamento por promover a liberação de fatores de crescimento que estimulariam a angiogênese, quimiotaxia e síntese de novas fibras musculares. Objetivo: Analisar os efeitos do PRP associado ou não a sutura, na regeneração e propriedades mecânicas do tecido muscular no período agudo de uma lesão muscular. Método: Foram utilizados 70 ratos distribuídos em 5 grupos: controle (C), controle lesão (CL), lesão e sutura (LS), lesão e PRP (LP), lesão, sutura e PRP (LSP). Utilizando um bisturi foi causada uma secção transversa na porção lateral do músculo gastrocnêmio. Vinte e quatro horas após a lesão muscular foi aplicado nos grupos LP e LSP, o PRP produzido com o sangue dos animais do grupo C. Os animais foram eutanasiados no sétimo dia após a lesão. Sete animais tiveram os músculos submetidos ao ensaio mecânico, enquanto os outros tiveram o tecido muscular congelado para análise histológica da inflamação, do colágeno muscular e estresse oxidativo por meio de espectroscopia de Raman. Foram utilizados testes de distribuição gaussiana seguidos de testes paramétricos e não paramétricos para diferenciação estatística dos grupos, tendo como significância 5%. Resultados: Os colágenos tipo I e III estavam em maior quantidade nos grupos LP e LSP em relação aos grupos C e CL, além disso, o grupo LP teve maior quantidade de colágeno tipo I que o grupo LS. O grupo LP também apresentou média de força máxima obtida pelo ensaio mecânico, superior ao grupo CL e semelhante ao grupo C. A análise histológica mostrou um processo inflamatório crônico em todos os grupos lesados, e em maior intensidade nos grupos LP e LSP. O estresse oxidativo visto pela relação das moléculas de NADH/NAD, mostrou um maior estresse nos grupos LS e LSP, comparados ao grupo C. Conclusão: O PRP isolado aumentou o colágeno, a força máxima suportada e intensificou a inflamação, enquanto a sutura diminuiu a rigidez muscular e aumentou o estresse oxidativo observado no músculo. O PRP foi eficaz em diminuir a perda de força máxima causada pela lesão, enquanto a sutura muscular não trouxe efeito benéficoAbstract: Introduction: Muscle injuries are divided in mild, moderate and severe, corresponding to the quantity of rupture muscle fibers. The standard treatment for the severe injuries is the suture of the edges of the ruptured muscle. The local application of Plaque Rich Plasma (PRP) has been considered an alternative treatment because it promotes the release of growth factors that would stimulate angiogenesis, chemotaxis and synthesis of new muscle fibers. Objective: To analyze the effects of PRP, associated or not to suture, on regeneration and mechanical properties of muscle tissue in the acute period of a muscle injury. Method: Seventy-five rats were distributed in five groups: control (C), control lesion (CL), lesion and suture (LS), lesion and PRP (LP), lesion, suture and PRP (LSP). A transverse section was produced with the use of scalpel in the lateral portion of the gastrocnemius muscle. Twenty-four hours after the muscle injury was applied in the LP and LSP groups, the PRP produced with the blood of the C group. The animals were euthanized on the seventh day after injury. Seven animals had muscles undergoing mechanical testing, while others had frozen muscle tissue for histological analysis of inflammation, muscle collagen and oxidative stress by means of Raman espectroscopy. Gaussian distribution tests followed by parametric and nonparametric tests were used for statistical differentiation of the groups, with a significance of 5%. Results: It was found that type I and III of collagen had a higher quantity in groups LP and LSP, compared to groups C and CL, moreover the LP group had greater amount of collagen type I than the LS group. The LP group had a mean of Maximum Load obtained by mechanical testing, higher than the CL group, and similar to the C group. The histological analysis showed a chronic inflammatory process in all the injured groups, and greater intensity in the LP and LSP groups. The oxidative stress seen by the ratio of the NADH/NAD molecules, showed a higher stress in the LS and LSP groups, compared to the C group. Conclusion: The application of the isolated PRP increased the collagen, maximum strength supported and intensified the inflammation, while suture decreased muscle stiffness and increased oxidative stress observed in muscle. The PRP was effective in reducing the maximum force loss caused by the injury, while the muscular suture did not have a beneficial effectMestradoFisiopatologia CirúrgicaMestre em Ciências2017/06930-0FAPESPCAPE