Research of adenovirus, polyomavirus, cytomegalovirus and human herpesvirus 6 and 7 in pediatric patients with glomerular disease

Orientadores: Sandra Helena Alves Bonon, Vera Maria Santoro BelangeroTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências MédicasResumo: Poucos estudos com infecções virais utilizam como grupo de estudo pacientes pediátricos com doenças glomerulares. Objetivos: verificar a frequência de infecção ativa causada pelos herpesvírus Epstein-Barr (EBV), citomegalovírus humano (HCMV), herpesvírus humano 6 (HHV-6 tipos A/B) e o herpesvírus humano 7 (HHV-7) e dos vírus adenovírus humano (HAdV) e poliomavírus humano (BKV) em crianças e adolescente com doenças glomerulares e analisar uma possível associação entre infecção ativa viral e outros dados clínicos. Pacientes e Métodos: foram elaborados dois estudos, um transversal contendo 83 pacientes e outro longitudinal, com uma coorte prospectiva de 35 pacientes, monitorados semanalmente e mensalmente. Coletou-se plasma e/ou urina para extração de DNA e, através da utilização de técnica de detecção de ácidos nucleicos, a NESTED-PCR, foi possível detectar o DNA viral nestas amostras. No estudo transversal, a idade média foi de 10 anos (1,4-19±4,4 anos), sendo 46 pacientes do sexo masculino (55,4%). Cinquenta pacientes estavam em remissão no momento da coleta (60,2%). Nessa casuística, 31/83 (37%) tiveram viremia ou virúria presente. A distribuição dos resultados do DNA dos vírus encontrados foi: onze casos HHV-7, nove HHV-6, cinco HCMV, 4 adenovírus, 2 casos BKV e 2 EBV, sendo que dois pacientes apresentaram dois vírus na mesma amostra. A frequência de vírus nos pacientes com recidiva da doença de base foi maior do que nos pacientes em remissão (47% vs 32%), embora essa diferença não seja estatisticamente significativa (p=0,131). A ocorrência dos vírus na doença secundária foi maior do que nos pacientes com glomerulopatia primária (60% vs 34%), (p=0,164). A distribuição do tipo de vírus mostrou maior frequência de HCMV na glomerulopatia primária (p=0,07). Com relação à faixa etária, dos 31 pacientes com resultados de vírus positivo, 21 eram maiores de 10 anos, enquanto que somente 10 tinham menos que 10 anos (p=0,014). Não houve associação entre a dose de prednisona ou a dose de ciclosporina e a presença de viremia ou virúria (p=0,583 e p=0,62, respectivamente). No estudo longitudinal, trinta e sete amostras biológicas apresentaram DNA positivo para um ou mais vírus analisados do total de amostras coletadas (8%). Infecções ativas virais foram detectadas em 11/35 pacientes (31,4%). Coinfecção viral ocorreu em 6/11 pacientes (54,5%), recorrência viral em 4/11 (36,4%) e infecção viral consecutiva em 7/11 (63,6%). Dez pacientes com infecção ativa viral estavam em recidiva (91%) e 1 estava em remissão (9%). Oito pacientes com infecção ativa viral foram hospitalizados em relação aos que não tiveram infecção ativa viral (72,7% vs 16,7%) e esta diferença foi estatisticamente significativa (p=0,0022). Infecção ativa pelo HCMV foi a mais frequente em 6/11 pacientes (54,5%). Destes, 3/6 (50%) tiveram provável doença por HCMV no trato gastrointestinal e um deles teve coinfecção pelo vírus HHV-7. As frequências das outras infecções ativas virais foram: 45,5% para BKV, 27,3% para HHV-7, 18,2% para EBV, 18,2% para AdVH e para HHV-6 foi 9%. O monitoramento das infecções ativas causadas por vírus em pacientes pediátricos com DG apresentada neste estudo é muito importante porque possibilitou identificar infecções virais ativas que podem causar recidiva, hospitalização e outras complicações nestes pacientesAbstract: Few studies with viral infections use pediatric patients with glomerular diseases. Objectives: To verify the frequency of active infection caused by herpesvirus Epstein-Barr (EBV), human cytomegalovirus (HCMV), human herpesvirus 6 (HHV-6 types A / B) and human herpesvirus 7 (HHV-7), adenovirus (HAdV) and human polyomavirus (BKV) in children and adolescents with glomerular diseases and to analyze a possible association between active viral infection and other clinical data. Patients and methods: Two studies were performed, a a cross-sectional one containing 83 transplant patients and other longitudinal, with a prospective cohort of 35 patients, monitored weekly and monthly. Plasma and/or urine were collected for DNA extraction and, through the use of nested-PCR technique, it was possible to detect viral DNA in these samples. In the cross-sectional study, mean age was 10 years (1.4-19 ± 4.4 years), of which 46 were male (55.4%). Fifty patients were in remission at the time of collection (60.2%). In this series, 31/83 (37%) had presented viremia or viruria. The distribution of the DNA results of the virus found was: 11 cases of HHV-7, 9 of HHV-6, 5 of HCMV, 4 cases of adenovirus, EBV and BKV was 2 cases, were two patients had shown two viruses in the same sample. The frequency of virus in patients with relapse of their disease was higher than in patients in remission (47% vs 32%), although this difference was not statistically significant (p=0.131). The occurrence of the viruses in the secondary disease was higher than in the patients with primary glomerulopathy (60% vs 34%), (p = 0.164). The distribution of each virus showed a higher frequency of HCMV in primary glomerulopathy (p = 0.07). Regarding the age group, 21 of the 31 patients with positive virus results were older than 10 years, while only 10 were less than 10 years old (p = 0.014). There was no association between the dose of prednisone or the dose of cyclosporine and the presence of viremia or viruria (p =0.583 and p=0.62, respectively). In the longitudinal study, thirty-seven biological samples presented DNA positive for one or more virus analyzed from the total samples collected (8%). Viral active infections were detected in 11/35 patients (31.4%). Viral co-infection occurred in 6/11 patients (54.5%), viral recurrence in 4/11 (36.4%) and consecutive viral infection in 7/11 (63.6%). Ten patients with active viral infection were relapsed (91%) and 1 were in remission (9%). Eight patients with active viral infection were hospitalized compared to those who did not have active viral infection (72.7% vs. 16.7%) and this difference was statistically significant (p= 0.0022). Active HCMV infection was the most frequent in 6/11 patients (54.5%). Of these, 3/6 (50%) had probable HCMV disease in the gastrointestinal tract and one of them had coinfection with the HHV-7 virus. The frequencies of the other viral active infections were: 45.5% for BKV, 27.3% for HHV-7, 18.2% for EBV, 18.2% for AdVH and for HHV-6 was 9%. The monitoring of active infections caused by viruses in pediatric patients with GD presented in this study is very important and thus it was possible to identify active viral infections that can cause relapse, hospitalization and other complications in these patientsDoutoradoSaude da Criança e do AdolescenteDoutora em Ciências2016/07892-2FAPES