Characterization of neutrophil and theis products in the peripheral blood of patients with coronary arterial disease

Orientador: Maria Heloisa de Souza Lima BlottaDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências MédicasResumo: A aterosclerose é uma doença inflamatória crônica caracterizada pela retenção de lipídios e células da resposta imunológica na íntima arterial. Monócitos e macrófagos são células centrais no processo da formação da lesão de ateroma, entretanto, um crescente número de evidências aponta para a participação dos neutrófilos, principalmente nos estágios mais tardios da doença. Os neutrófilos contribuem para a propagação da inflamação através de produção e liberação de mediadores locais, que induzem um maior recrutamento de leucócitos. Além disso, produzem múltiplas proteases capazes de degradar a matriz extracelular e atuando no processo de desestabilização e consequente ruptura da placa aterosclerótica. A existência de subpopulações de neutrófilos com heterogeneidade funcional e fenotípica e funções pró e anti-inflamatória vem sendo descrita em doenças inflamatórias crônicas, mas ainda não foram caracterizadas em doenças cardiovasculares. O presente estudo teve por objetivo evidenciar a participação dos neutrófilos em diferentes estágios da doença arterial coronariana (DAC). Para tal, neutrófilos do sangue periférico de pacientes com DAC (doença coronariana crônica - DCC e síndrome coronariana aguda - SCA) e controles com (FR) e sem (C) fatores de risco para aterosclerose foram avaliados quanto a expressão de marcadores de membrana por citometria de fluxo e a concentração de produtos de neutrófilos foi determinada no plasma por ELISA. Observamos uma maior expressão de moléculas de adesão como CD11b nos grupos FR, DCC e SCA. O grupo DCC apresentou uma maior frequência de neutrófilos CD54+ e CCR5+, além de uma maior expressão da glicoproteína CD177, enquanto o grupo SCA apresentou maior frequência de CXCR1+. Os mesmos grupos apresentaram concentrações plasmáticas mais elevadas de mieloperoxidase e elastase neutrofílica em relação ao grupo controle, enquanto os níveis de IL-8 e NGAL foram maiores nos pacientes com DCC. A dosagem de dsDNA, que reflete a formação de NETs, também foi maior no grupo com DCC e indivíduos com FR. Em conjunto, nossos resultados mostraram alterações na população de neutrófilos, bem como na produção de seus mediadores nos diferentes estágios da doença aterosclerótica indicando a sua participação no processo de aterogêneseAbstract: Atherosclerosis is a chronic inflammatory disease characterized by retention of lipid and immune response cells in the arterial intima. Monocytes and macrophages are central cells in the process of atheroma lesion formation, however, a growing body of evidence points to the involvement of neutrophils, especially in the later stages of the disease. Neutrophils contribute to the spread of inflammation through the production and release of local mediators, which induce a higher recruitment of leukocytes. In addition, they produce multiple proteases capable of degrading the extracellular matrix and acting in the process of destabilization and consequent rupture of the atherosclerotic plaque. The existence of neutrophil subpopulations with functional and phenotypic heterogeneity and pro and anti-inflammatory functions has been described in chronic inflammatory diseases, but they have not yet been characterized in cardiovascular diseases. The present study aimed to evidence the participation of neutrophils in different stages of coronary artery disease (CAD). Peripheral blood neutrophils from patients with CAD (Stable angina - SA and unstable angina) and controls with (RF) and without (C) risk factors for atherosclerosis were evaluated for expression of membrane markers by flow cytometry and the concentration of neutrophil products was determined in the plasma by ELISA. We observed a greater expression of adhesion molecules such as CD11b in the RF, SA and UA groups. The SA group had a higher frequency of CD54 + and CCR5 + neutrophils, in addition to a greater expression of the CD177 glycoprotein, while the CAD group had a higher frequency of CXCR1 +. The same groups had higher plasma concentrations of myeloperoxidase and neutrophil elastase than the control group, whereas IL-8 and NGAL levels were higher in patients with SA. The dosage of dsDNA, which reflects the formation of NETs, was also higher in the group with SA and individuals with RF. Taken together, our results showed changes in the neutrophil population, as well as in the production of its mediators in the different stages of atherosclerotic disease, indicating its participation in the atherogenesis processMestradoPatologia ClinicaMestra em Ciências1693706308746/2013-9CAPESCNP