Molecular detection of viral infections in pediatric cancer patients with fever and neutropenia

Orientador: Sandra Helena Alves BononTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências MédicasResumo: Pacientes com câncer possuem longos períodos de neutropenia grave e são particularmente vulneráveis às infecções. Muitos episódios de neutropenia febril são tratados com antibióticos de amplo espectro, sem identificação do foco e microrganismo causador da infecção. Os testes moleculares, como a reação em cadeia da polimerase podem contribuir para a detecção de microrganismos causadores de infecção nessa população, otimizando os resultados e possibilitando aos médicos assistentes decidir sobre o tratamento. O objetivo principal deste estudo foi detectar a presença de material genético de vírus de maior ocorrência na população infantil em pacientes portadores de doença oncológica com neutropenia febril, como os herpesvírus Epstein Barr (EBV), Citomegalovírus (CMV), Herpesvírus 6 (HHV-6) e Herpesvírus 7 (HHV¿7). Outros vírus pesquisados foram: Parvovírus B19 (PvB19), Poliomavírus (BKV) e o Adenovírus (AdV). Amostras de soro de pacientes de 3 a 14 anos foram avaliadas através de técnicas de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e de marcadores bioquímicos de infecção. Amostras de sangue total e urina também foram coletadas para a realização dos exames de cultura microbiológica, seguindo os protocolos internos dos hospitais. Foram incluídos 58 pacientes com neutropenia febril. Dentre as hemoculturas coletadas destes pacientes, 4/58 (7%) foram positivas e dentre as uroculturas, 1/58 (1,7%) foi positiva. Pela reação em cadeia da Polimerase tipo nested, os vírus HHV-6 e HHV-7 foram os mais detectados, com positividade em 12/58 (20,7%) e 14/58 (24,1%) amostras, respectivamente. Através da técnica da PCR em Tempo Real, o PvB19 foi positivo em 10/58 (17,2%), CMV em 6/58 (10,3%) e o BKV em 2/58 (3,4%). Coinfecção viral foi detectada em 7/58 (12,1%) amostras com associação a sintomas respiratórios em 5/7 (71,4%) pacientes. Os resultados de proteína C reativa tiveram maior concentração nas infecções bacterianas, com média de 113 mg/dL, enquanto que em infecções virais a média foi de 11 mg/dL, não foi fator preditivo para a detecção de infecções. As análises dos resultados obtidos através das técnicas de biologia molecular mostraram que em crianças e adolescentes com neutropenia febril a presença dos vírus detectados é comum e podem contribuir para o aumento da morbidade. Com a utilização da detecção molecular destas viroses, podem ocorrer consequências favoráveis como a diminuição dos gastos hospitalares e o aumento da eficácia da terapiaAbstract: Patients with malignancies have long periods of severe neutropenia and are particularly vulnerable to infectious complications. Most episodes of febrile neutropenia are treated with empiric broad-spectrum antibacterial therapy without identifying the site or causative agent of infection. Molecular tests with a polymerase chain reaction may contribute to detection of microorganisms that cause infection, optimizing the results and helping it possible for medical assistant¿s decision about treatment. The aim of this study was to identify the genome of herpes virus Epstein Barr Virus (EBV), Cytomegalovirus (CMV), Human Herpes virus - 6 (HHV-6), Human Herpes virus - 7 (HHV-7), and others virus with Parvovirus B19 (PvB19), Polyoma virus (BKV), and Adenovirus (AdV). Serum samples of pediatric cancer patients of 3 to 14 years old were analyzed by Polymerase Chain Reaction (PCR) and for biochemistry marks of infectious disease. Whole blood and urine were collected for cultures were performed using an internal protocol. Fifty-eight cancer patients were included with fever and neutropenia. Among blood culture collected 4/58 (7%) were positive and 1/58 (1.7%) to urine culture was positive for this patients. For nested-PCR HHV-6 and HHV-7 were the most commonly detected viruses in 12/58 (20.7%) and 14/58 (24.1%) of samples, respectively. Through of real time PCR the PvB19 was positive in 10/58 (17.2%), CMV in 6/58 (10.3%) and BKV in 2/58 (3,4%). The presence of viral DNA of two or more microorganisms were observed in 7/58 (12.1%) and patients with respiratory diseases in 5/7 (71.4%). The C reaction protein (CRP) results had high concentration in bacterial infections with media oh 113 mg/dL. Although, viral infections had a media of 11 mg/dL, and were not a good predictive factor for detection of viral infections. The analyzed of these results checked through molecular methods showed that in children and young patients with febrile neutropenia the virus presence is common and may contribute for high incidence of morbidity. The utility of molecular detection of these viruses, favorable consequences to help such as the reduction of hospital expenses and the increase of the efficacy therapyDoutoradoClinica MedicaDoutor em Ciência