Evaluation of the presence of microorganisms and antimicrobial susceptibility of Enterococcus faecalis isolated from root canal of teeth undergoing endodontic retreatment for prosthetic reason

Orientador: Brenda Paula Figueiredo de Almeida GomesDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de PiracicabaResumo: Os micro-organismos e seus subprodutos são responsáveis pelo desencadeamento das infecções secundárias e/ou persistentes dos canais radiculares(CR). A diversidade microbiana destes canais é menor, quando comparada à da infecção primária, com prevalência da espécie bacteriana Enterococcus faecalis. Objetivos: Avaliar a presença de micro-organismos e a suscetibilidade antimicrobiana de E. faecalis isolados de dentes submetidos ao retratamento endodôntico por motivo protético. Foi feito o monitoramento microbiológico antes e após o preparo químico-mecânico (PQM) e após o uso de uma medicação intracanal. Metodologia: Vinte dentes indicados para retratamento endodôntico por motivo protético com ausência de lesão periapical foram incluídos nesta pesquisa. Amostras microbianas coletadas dos CR foram plaqueadas em FAA (Fastidious Anaerobe Agar) e em meio seletivo m-Enterococcus. Detecçao de E. faecalis foi realizada por PCR com primer espécie-específico e sequenciamento parcial do gene 16S rRNA. As cepas isoladas de E. faecalis, foram testadas quanto sua suscetibilidade antimicrobiana, através do método de difusão em disco. Resultados: Micro-organismos foram encontrados em todos os CR, havendo uma redução nos seus níveis após o PQM e uso da medicacao intracanal. Sete CR apresentaram crescimento microbiano no meio seletivo. Dos 43 micro-organismos que cresceram no m-Enterococcus, 41 cepas foram identificadas como E. faecalis por PCR com primer espécie-específico e sequenciamento. Destes isolados, foi observada suscetibilidade das cepas à amoxicilina (41/41), amoxicilina com ácido clavulânico (38/41), ampicilina (38/41), doxiciclina (33/41) fosfomicina (33/41) e tetraciclina (30/41). Entre as cepas, houve resistência à clindamicina (38/41), gentamicina (35/41), rifampicina (20/41) e vancomicina (17/41). Conclusão: Micro-organismos foram encontrados nos CR de dentes indicados ao retratamento por motivo protético e sem lesão periapical. O meio seletivo m-Enterococcus mostrou alta especificidade com resultados similares ao método molecular. As cepas isoladas de E. faecalis apresentaram variados graus de resistência aos agentes antimicrobianos, sendo mais suscetíveis à amoxicilina, amoxicilina + ácido clavulânico e ampicilinaAbstract: Microorganisms and their by-products are responsible for the triggering of secondary and / or persistent root canal (RC) infections. The microbial diversity of these root canals is lower when compared to the primary infection, with a prevalence of the bacterial species Enterococcus faecalis. Objectives: To evaluate the presence of microorganisms and antimicrobial susceptibility of E. faecalis isolated from teeth submitted to endodontic retreatment due to prosthetic reasons. Microbiological monitoring was done before and after the chemical-mechanical preparation (PQM) and after the use of an intracanal medication. Methodology: Twenty teeth indicated for endodontic retreatment due to prosthetic reasons with absence of periapical lesion were included in this study. Microbial samples collected from RC were plated in FAA (Fastidious Anaerobe Agar) and in m-Enterococcus selective medium. Detection of E. faecalis was performed by PCR with primer-specific and partial sequencing of the 16S rRNA gene. The strains isolated from E. faecalis were tested for their antimicrobial susceptibility by the disc diffusion method. Results: Microorganisms were found in all RCs, with a reduction in their levels after PQM and intracanal medication use. Seven RC showed microbial growth in the selective medium. Out of the 43 microorganisms grown on m-Enterococcus, 41 strains were identified as E. faecalis by PCR with specific primer and sequencing. Susceptibility against amoxicillin (41/41), amoxicillin with clavulanic acid (38/41), ampicillin (38/41), doxycycline (33/41) fosfomycin (33/41) and tetracycline (30/41) was observed in the tested strains. Among the strains, there was resistance against clindamycin (38/41), gentamicin (35/41), rifampicin (20/41) and vancomycin (17/41). Conclusion: Microorganisms were found in all the cases indicated to the endodontic retreatment due to prosthetic reasons. The selective medium m-Enterococcus showed high specificity with similar results to the molecular methods. E. faecalis strains presented varying degrees of resistance to antimicrobial agents, being more susceptible to amoxicillin, amoxicillin + clavulanic acid and ampicillinMestradoEndodontiaMestra em Clínica Odontológica2015/23479-5308162/2014-5CAPESFAPESPCNP