Evaluation of cytotoxicity of phytochemicals in V79 cells and inhibition of cell growth in human leukemic cells

Orientador: Patricia da Silva MeloDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências AplicadasResumo: Compostos encontrados na natureza, mostram uma enorme gama de diversidade em termos de estrutura e atividades farmacológicas. Apesar dos avanços na sintese química, as plantas se mostram cada vez mais eficientes na busca de novos tratamentos contra o câncer. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar seis fitoterápicos pertencentes à classe de lignoides (dimethoxymagnolol, grandisina e iangambina) e riparinas (I, II e III) , com e sem suplementação de glutationa (GSH - 1mM) em três linhagens de células leucêmicas K562, U937 e HL60. A viabilidade celular foi avaliada por ensaio de redução de MTT em células leucemicas tratadas com os fitoquímicos (com ou sem suplementação de GSH). Nas células U937 foram encontrados valores de IC50 de 100 ?M, 30 ?M e 500 ?M em células tratadas com dimethoximagnolol, grandisina e iangambina, respectivamente, e 60, 25 e 15 ?M (riparina I, II e III, respectivamente). Nas células K562, o tratamento com riparinas foi o mais eficaz dos compostos estudados , uma vez que foram determinados valores de IC50 de 125, 27 e 15 ?M ( riparina I, II e III, respectivamente). Diferentes valores foram encontrados em células HL60 tratadas com riparinas (140, 100 e 75 ?M para riparina I, II e III, respectivamente). A suplementação com GSH amenizou apenas os efeitos tóxicos após tratamento das células U937 com riparina II, uma vez que não foram observados resultados diferentes em outras linhagens celulares tratadas com os compostos estudados com a suplementação de GSH. A citotoxicidade desses fitoquímicos também foi avaliada em linhagem de células de fibroblasto de pulmão permanente (V79), que são células de cultura utilizadas para os estudos de citotoxicidade. Todos os fitoquímicos investigados, com exceção da iangambina, foram menos tóxicos para células V79 do que para as células leucêmicas. Estes resultados se mostram positivos, uma vez que a atividade farmacológica foi maior nas células leucêmicas do que nas células V79. Todos os compostos estudados neste trabalho apresentaram efeitos anti-tumorais, no entanto, o mecanismo de ação da riparina II é diferente em células U937 já que a suplementação com GSH foi eficaz contra os efeitos tóxicos. Provavelmente, a riparina II provocou a morte celular por estresse oxidativoAbstract: Compounds found in nature, show an enormous range of diversity in terms of structure and pharmacologic activities. Plants play a surprisingly important source of new treatments for cancer, despite advances in chemical synthesis. Thus the aim of this study was to evaluate six phytomedicine belonging to the class of lignoid (dimethoxymagnolol, grandisin and yangambin) and riparins (I, II and III) with and without glutathione supplementation (GSH ¿ 1mM) in three leukemic lines, K562, U937 and HL60. The cell viability was evaluated by MTT reduction assay in leukemic cells treated with the phytochemicals (with or without GSH supplementation). In the U937 cell IC50 values found were 100 µM, 30 µM and 500 µM in the cells treated with dimethoximagnolol, grandisin and yangambin, respectively and 60, 25 and 15 µM (riparin I, II and III, respectively). In K562 cells the treatment with riparins were the most effective class of compounds studied since it was determined IC50 values of 125, 27 and 15µM (riparin I, II and III, respectively). Different values were determined in the HL60 cells treated with riparins (140, 100 and 75 ?M for riparin I, II and III, respectively). GSH ameliorated only the toxic effects evaluated in U937 cell treated with riparin II, since it was not observed different results in the others cell lines treated with the studied compounds plus GSH. The cytotoxicity of phytochemicals was also assessed in a permanent lung fibroblast cell line (V79) culture that are cells commonly used for cytotoxicity studies. All the phytochemicals investigated, with the yangambin exception, were less cytotoxic to V79 cells than to leukemic cells. These results indicate a positive pharmacologic application since the leukemic activity was major than to the toxic effects evaluated in the V79 cells. All the compounds investigated in this work has antitumoral effects, however the action mechanism of riparin II is different on U937 cell since GSH supplementation protected the toxic effects. Probably, riparin II triggered cell death by stress oxidative pathwayMestradoMetabolismo e Biologia MolecularMestra em Ciências da Nutrição e do Esporte e Metabolism