Effects of the polymorphism T-786C of endothelial nitric oxide synthase (eNOS) gene and/or atorvastatin on parameters of lipid metabolism in asymptomatic adults

Orientadores: Eliana Cotta de Faria, José Eduardo Tanus dos SantosDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências MédicasResumo: O óxido nítrico (NO) é produzido no endotélio vascular pela óxido nítrico sintase endotelial (eNOS), enzima regulada negativamente pela presença do polimorfismo T- 786C, levando à disfunção endotelial. A lipoproteína de alta densidade (HDL) têm funções anti-aterogênicas bem estabelecidas, incluindo mecanismos que aumentam a atividade da eNOS. As estatinas são fármacos que possuem, dentre seus efeitos pleiotrópicos, a melhora na função do endotélio e na composição da HDL. Dada a importância tanto da expressão quanto da atividade da eNOS para a função endotelial, bem como dos efeitos pleiotrópicos das estatinas sobre estas duas variáveis, avaliamos os parâmetros bioquímicos e a composição das sub-frações de HDL (HDL2 e HDL3) após uso de placebo e atorvastatina em uma amostra populacional de 30 indivíduos, divididos em dois grupos: 15 indivíduos portadores do polimorfismo T-786C do gene da eNOS (CC) e 15 não portadores (TT). Duzentos indivíduos foram genotipados, e pareamos conforme idade e IMC 15 indivíduos TT e 15 indivíduos CC, que receberam placebo e/ou atorvastatina na dose de 10mg/dia, por 14 dias. Os parâmetros séricos analisados foram determinados através de métodos bioquímicos enzimáticos, radiométricos, nefelométricos e microultracentrifugação. Mediu-se lípides, lipoproteínas, composição das sub-frações da HDL (HDL2 e HDL3), apolipoproteínas, atividade da proteína de transferência de colesteril éster, metabólitos do NO e proteína C reativa. Após o uso da estatina, como esperado, drásticos efeitos redutores foram observados tanto nos lípides, lipoproteínas, apolipoproteínas e de forma independente do polimorfismo, além da redução de ácidos graxos livres nos portadores do genótipo CC. Nas sub-frações a relação lípides/proteínas foi reduzida tanto em HDL2 quanto em HDL3.O aumento da atividade da CETP nos portadores foi corrigido pela estatina e os níveis de ácidos graxos livres reduziram-se de maneira polimorfismo-dependente, em oposição à redução observada do nitrito, que foi polimorfismo-independente. usPCR e Lp(a) não se modificaram. A atorvastatina pode ter atuado sobre o transporte reverso de colesterol através da redução da atividade da lipase hepática e aumento de atividade da PLTP. Foram observadas interações genótipo/tratamento limítrofes para CETP e Lp(a). Estes resultados sugerem que o tratamento com estatinas pode ser relevante na prevenção primária da aterosclerose em portadores do polimorfismo, independentemente de modificações lipídicas séricas. Portanto estes indivíduos se beneficiariam com o uso de estatinas através da modulação da atividade da CETP e redução da concentração de ácidos graxos livres.Abstract: Nitric oxide (NO) is produced in the vascular endothelium by endothelial nitric oxide synthase (eNOS), an enzyme negatively regulated by the presence of the T-786C polymorphism, leading to endothelial dysfunction. High-density lipoproteins (HDL) have well-established anti-atherogenic functions, for example mechanisms that enhance eNOS activity. Statins are drugs that have pleiotropic effects, such as the improvement in endothelial function and beneficial composition of HDL. Taking into account both the activity of eNOS on endothelial function, and the validity of the pleiotropic effects of statins, we evaluated the biochemical parameters and the composition of subfractions of HDL (HDL2 and HDL3) after use of placebo and atorvastatin at a dose of 10mg/day for 14 days, in a population sample of 30 individuals divided into two genotype groups of the T-786C polymorphism of the eNOS gene: CC (carriers) or TT (non-carriers). Two hundred individuals were genotyped, and the selected groups paired by age and BMI. The serum parameters analyzed were determined using biochemical enzymatic, radiometric, nephelometric and microultracentrifugation methods. We measured lipids, lipoproteins, the composition of sub-fractions of HDL (HDL2 and HDL3), apolipoproteins, activity of cholesteryl ester transfer protein, NO metabolites and hsCRP. After statin, as expected, drastic effects were observed both in lipids, lipoproteins, apolipoproteins, independently of the polymorphism. In HDL sub-fractions the ratio lipid/protein was smaller in both HDL2 and HDL3. CETP activity and free fatty acids were reduced in a polymorphism-dependent manner, and the reduction of nitrite was polymorphism-independent. hsCRP did not change. Atorvastatin may have acted on the reverse cholesterol transport by reducing the activity of hepatic lipase, increased PLTP activity and reducing CETP. There was a genotype/drug interaction effect on CETP and Lp(a). These results suggest that statin treatment may be relevant for primary prevention of atherosclerosis in patients with the polymorphism, irrespective of serum lipid changes. These individuals would benefit from the use of statins because of reduction of CETP activity and free fatty acids.MestradoCiencias BiomedicasMestre em Ciências Médica