Microbiologic investigation, quantification of endotoxin and antimicrobial susceptibility in primary endodontic infection and the salivary carriage of selected endodontic pathogens

Orientador: Brenda Paula Figueiredo de Almeida GomesDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de PiracicabaResumo: O conhecimento das espécies microbianas assim como da suscetibilidade das mesmas à terapia endodôntica é importante para o sucesso do tratamento. Sendo assim, a proposta do presente estudo foi: 1) Analisar a microbiota endodôntica de dentes com necrose pulpar e presença de lesão periapical (C1) e correlacionar com os sinais e sintomas clínicos; 2) investigar mudanças microbiológicas após o preparo químico-mecânico (PQM) (C2); 3) investigar a presença de Entreococcus spp., Candida spp. e enterobactérias na saliva dos pacientes submetidos a terapia endodôntica; 4) quantificar endotoxinas antes (C1) e após PQM (C2); 5) determinar in vitro a suscetibilidade antimicrobiana de algunsmicrorganismos isolados das infecções endodônticas primárias. Amostras microbiológicas foram coletadas da saliva e do canal radicular de 30 pacientes. Foram identificados 182 microrganismos nos canais radiculares, sendo 65,38% anaeróbios estritos. As espécies mais freqüentemente encontradas foram P. micros (63,3%), P. intermedia (50%), S. mitis (30%). Associações positivas foram encontradas entre dor à percussão e E. lentum; dor à palpação e G.haemolysans e E. lentum; fístula e P. micros; exsudato purulento e Bifidobacterium spp. As espécies Peptostreptococcus spp., Fusobacterium spp., Porphyromonas spp., Prevotella spp. foram analisadas e mostraram-se suscetíveis a ação da amoxicilina e da mesma associada ao ácido clavulânico. Maiores concentrações de endotoxinas foram quantificadas nos dentes com sintomatologia clínica. Associação positiva entre LPS e a presença de dor à percussão foi encontrada (p<0,01) Conclusão: A infecção endodôntica primária caracterizou-se ser do tipo mista e polimicrobiana, com predomínio de microrganismos anaeróbios estritos, principalmente bacilos Gramnegativos; a presença de sinais e/ou sintomas clínicos mostrou estar relacionada com determinadas espécies tais como Eubacterium lentum, Gemella haemolysans, Peptostreptococcus micros e Bifidobacterium spp. comumente isoladas em infecções endodônticas primárias; Candida spp. e Enterococcus spp. foram mais freqüentemente isolados da saliva do que as Enterobacteria spp. O isolamento das espécies C. albicans e E. faecalis no canal radicular foram associados com a identificação das espécies na saliva; o PQM dos canais radiculares foi eficaz na redução do número de microrganismos. Mudança na microbiota foi encontrada após PQM. Amoxicilina associada ao ácido clavulânico mostrou ser uma potente combinação contra microrganismos envolvidos na infecção de origem endodôntica. Altas concentrações de endotoxinas nos canais radiculares parecem estar relacionadas com a presença de sintomatologia clínica, particularmente com a dor à percussão. O PQM foi capaz de reduzir a concentração inicial de endotoxinas em todos os canais radiculares, entretanto não foi capaz de eliminá-lasAbstract: Bacteria and their by-products play an important role in the etiology and development of pulp and periapical diseases. The knowledge of endodontic microbiota and its susceptibility to endodontic therapy is important to a successful treatment. Therefore the aims of this study were: 1) to analyse the root canal microbiota in infected teeth with pulp necrosis and periapical lesions (C1) and its correlation with the clinical signs and symptoms; 2) to investigate the variations in the susceptibilities of endodontic microflora to biomechanical procedures (C2); 3) to investigate Candida spp., Enterococcus spp. and enterobacteria in saliva from the patients under endodontic therapy; 4) to quantify endotoxins before (C1) and after chemo-mechanical preparation (CMP) (C2); 5) to determine in vitro the antimicrobial susceptibility rates of the microrganisms recovered from the root canals with primary endodontic infections. Thirty root canals were microbiologically sampled before (C1) and after CMP (C2). At the baseline samples (C1), a total of 182 microrganisms were identified. Strict anaerobic or microphilic species predominated in 65.38%. P. micros (63.3%), P. intermedia (50%), S. mitis (30%) were the most frequent species recovered from the root canals at the baseline samples (C1). Associations between terderness to percussion and the presence of E. lentum; pain on palpation and G. haemolysans and E. lentum; sinus tract and P. micros; Purulent exudate and Bifidobacterium spp. (p<0.05) were found. Peptostreptococcus spp., Fusobacterium spp., Porphyromonas spp., Prevotella spp. were susceptible to amoxicilin and amoxicillin + clavulanate. Higher levels of endodotoxin were detected in teeth with clinical symtphomatology. A positive association was found between the presence of LPS and tenderness to percussion (p