Birrefringencia da matriz organica do esmalte dentario

Orientador: Sergio Roberto Peres LineDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de PiracicabaResumo: A formação do esmalte dentário é um processo biológico complexo, sendo dependente do estabelecimento de uma matriz orgânica bem estruturada. Evidências recentes indicam que os componentes desta matriz formam uma organização supramolecular, cuja significância biológica não é claramente entendida. Este fato é devido em parte a dificuldades em observações morfológicas diretas da matriz orgânica do esmalte estruturada. A detecção de propriedades anisotrópicas de estruturas biológicas tem sido extensivamente utilizada para o estudo de organizações supramoleculares em cortes histológicos comuns. O objetivo deste trabalho foi estudar a birrefringência da matriz orgânica do esmalte durante o desenvolvimento de dentes incisivos e molares de ratos. A amostra constituiu de dentes incisivos superiores e hemimandíbulas de ratos Wistar machos, pesando aproximadamente 300g. Foi realizada perfusão dos animais com paraformaldeído 2% e glutaraldeído 0,5% em solução tampão fosfato 0,2M, pH 7,2. Neste mesmo fixador, as amostras foram então imersas por 16h. A descalcificação foi procedida por imersão dos incisivos superiores e das hemimandíbulas em mistura de ácido nítrico 5% e formaldeído 10% durante 6h e 24h, respectivamente. Realizou-se inclusão em parafina e obtiveram-se cortes longitudinais de 5µm, os quais foram tratados com xilol e hidratados. Curvas de birrefringência de forma foram obtidas após mensurações de retardos óticos utilizando-se fluidos para montagem com diferentes índices de refração. Nossas observações mostraram que a matriz orgânica do esmalte de incisivos e molares de ratos é fortemente birrefringente. A birrefringência começa nos estágios iniciais da fase de secreção e desaparece na fase de maturação. Estes achados revelam que a matriz orgânica do esmalte apresenta uma estrutura supramolecular altamente ordenada. A análise da birrefringência da matriz orgânica do esmalte pode ser utilizada para detectar os efeitos de fatores genéticos e ambientais sobre sua orientação supramolecular e sua relação com defeitos no esmalte maduroAbstract: The formation of dental enamel is a complex biological process, which depends on a well-structured organic matrix. Recent evidences indicate that the components of this matrix can interact to form a supramolecular structure. The biological significance of this supramolecular organization is not clearly understood. In part this occurs due to methodological difficulties to perform direct morphological observations of the structured enamel organic matrix. The detection of anisotropic properties by polarizing microscopy has been extensively used to detect and measure the macromolecular organization in ordinary histological sections. The aim of this work was to study the birefringence of enamel organic matrix during the development of rat molar and incisor teeth. Wistar rats with approximately 300g were anesthetized with chloral hydrate and perfused with 2% paraformaldehyde 0.5% glutaraldehyde in 0.2 M phosphate buffer solution, pH 7.2. Upper incisor teeth and hemimandibles were then immersed in the fixative solution for 16h. Decalcification was performed by immersion of upper incisor teeth and hemimandibles in a mixture of 5% nitric acid and 10% formaldehyde for 6h and 24h, respectively. After dehydration, samples were embedded in paraffin and 5mm thick longitudinal sections were obtained. The sections were treated with xylol for removal of the paraffin, and hydrated. Form birefringence curves were obtained after measurements of optical retardations in imbibing media with different refractive indices. Our observation showed that enamel organic matrix of rat incisor and molar teeth is strongly birefringent. The birefringence starts at early secretion and disappears at maturation phase. The results show that enamel organic matrix presents a highly ordered supramolecular structure. The analysis of enamel organic matrix birefringence may be used to detect the effects of genetic and environmental factors on the supramolecular orientation of enamel matrix and its association with enamel defectsMestradoHistologia e EmbriologiaMestre em Biologia Buco-Denta