Atividade antiulcerogenica de extratos e frações obtidas dos escapos das especies Syngonanthus bisulcatus Rul. e Syngonanthus arthrotrichus Silveira em modelos animais

Orientador: Alba Regina Monteiro Souza BritoTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo: Syngonanthus bisulcatus e Syngonanthus arthrotrichus, espécies pertencentes à família Eriocaulaceae, são encontradas em regiões tropicais na América do Sul e no Brasil, principalmente nos estados da Bahia e Minas Gerais. Este gênero é conhecido popularmente como ¿sempre vivas¿. S. bisulcatus e S. arthrotrichus foram investigadas porque os dados quimiotaxonômicos e filogenéticos da família apontavam a presença de flavonóides, que possuem atividades biológicas relevantes. Os extratos etanólicos dessas espécies, nas doses de 50, 100 e 250 mg/kg, e as frações ricas (FRF) e deficientes (FDF) em flavonóides, na dose de 100 mg/kg via oral, foram estudadas em modelos de úlceras induzidas agudamente (HCl/etanol, etanol, estresse, indometacina/betanecol e isquemia e reperfusão) e subcronicamente (ácido acético 30%), em camundongos e ratos. A via intraduodenal foi empregada somente para frações no modelo de ligadura do piloro. Tanto extratos, quanto frações, inibiram significativamente as lesões ulcerativas induzidas pelos diferentes agentes. Também foram observadas alterações significantes nos parâmetros bioquímicos da secreção ácida gástrica com redução na concentração total de H+ no suco gástrico com conseqüente elevação do pH. Estes resultados sugeriram atividades anti-secretória e citoprotetora para extratos e frações. O pré-tratamento com as frações FRF de ambas as espécies produziu, no modelo de úlcera por ácido acético, redução na área da lesão por estimulação do processo de cicatrização. Adicionalmente, verificou-se que a atividade antiulcerogênica das frações não está relacionada ao aumento da PGE2; porém, o muco aderido, provavelmente estimulado pelo óxido nítrico, bem como os grupos sulfidrilas protéicos parecem estar envolvidos com a atividade citoprotetora de FRF, de FDF ou de ambas, dependendo do mecanismo de ação investigado. Animais tratados com as FRF das espécies em estudo e submetidos à indução de úlcera por etanol tiveram aumento significativo dos níveis séricos do hormônio somatostatina e redução no de gastrina. As FRF, estudadas em ratos submetidos à isquemia e reperfusão, produziram diminuição do número de lesões, indicando atividade antioxidante verificada através da redução da peroxidação lipídica e aumento dos níveis de grupamentos tióis totais. Por último, experimentos de citotoxicidade demonstraram que as frações da S. bisulcatus foram mais citotóxicas do que as frações da S. arthrotrichus em cultura de células V79. Análises cromatográficas e RMN demonstraram que as FRF contém luteolina e luteolina glicosilada para ambas as espécies, além de lutonarina (5,3¿,4¿-triidroxi-6-C,7-O-di-B-D-glucopiranosilflavona) e 6-hidroxi-7-O-B-D-glucopiranosilluteolina (5,6,3¿,4¿-tetrahidroxi-7-O-B-D-gluco-piranosil) para S. bisulcatus. Para a S. arthrotrichus, foram isoladas ainda apigenina e uteolina-6-C-?-D-glucopiranosideo. O conjunto de dados permite concluir que a atividade antiulcerogênica dos extratos e frações da S. bisulcatus e S. arthrotrichus está relacionada à atividade anti-secretória, citoprotetora e antioxidante dos flavonóides existentes nessas espéciesAbstract: The genus Syngonanthus (family Eriocaulaceae) is found in tropical regions of South America. In Brazil, the species Syngonanthus bisulcatus and Syngonanthus arthrotrichus, popularly known as ¿sempre vivas¿, occur mainly in the states of Bahia and Minas Gerais. Chemiotaxonomic and phylogenetic data have indicated the presence of flavonoids in both of these species. In this work, we investigated the effects of ethanolic extracts (50, 100 and 250 mg/kg, orally) and of flavonoid-rich (FRF) and -deficient (FDF) fractions (100 mg/kg, orally) of these species in models of acute (HCl/ethanol, ethanol, stress, indomethacin/bethanecol) and subchronic (30% acid acetic) ulcers in mice and rats, as well as in a model of pylorus ligature in which the fractions were administered intraduodenally. The extract and fractions significantly prevented ulceration caused by various agents, and also significantly reduced the total H+ concentration in gastric juice, which led to a rise in pH. These results indicated that the extract and fractions had antisecretory and cytoprotective actions. In acetic acid-induced ulcers, treatment with the fractions (FRF) from both species reduced the area of damage by enhancing the healing process. The antiulcerogenic activity of the fractions was not associated with an increase in PGE2 formation. In contrast, the amount of adhered mucus (probably stimulated by nitric oxide), together with the sulphydryl groups of proteins, appeared to be involved in the cytoprotection by FRF and FDF, depending on the mechanism of action. In animals pre-treated with the FRF of either species and then subjected to ulcer induction with ethanol, there was a significant increase in the serum levels of somatostatin and a reduction in those of gastrin. In rats with ischemia and reperfusion, FRF of both species increased the extent of injury, thus indicating an antioxidant activity that was reflected in a reduction in lipid peroxidation and an increase in the levels of total thiols. In cultured Chinese hamster V79 fibroblasts, the fractions of S. bisulcatus were more cytotoxic than those of S. arthrotrichus. Chromatographic analysis and NMR of the fractions of both species showed that the FRF contained luteolin and glycosylated luteolin, as well as previously detected flavonoids such as lutonarin 5'3¿,4¿-trihydroxy-6-C,7-O-di-B-D-glucopyranosylflavone) and 6-hydroxy-7-O-B-D-glucopyranosylluteolin (5,6,3¿,4¿-tetrahydroxy-7-O-B-D-glucopyranosyl), in the case of S. bisulcatus. In addition to luteolin, apigenin and luteolin-6-C-?-D-glucopyranoside were also detected in S. arthrotrichus. These results indicated that the antiulcerogenic activity of extracts and fractions of S. bisulcatus and S. arthrotrichus was related to the antisecretory, cytoprotective and antioxidant actions of flavonoids present in these plantsDoutoradoFisiologiaDoutor em Biologia Funcional e Molecula