Genetica da proteina de transferencia dos esteres de colesterol (CETP) na hiperalfalipoproteinemia e sua relação com a aterosclerose

Orientadores: Eliana Cotta de Faria, Helena Coutinho Franco de OliveiraTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias MedicasResumo: Em inúmeros estudos prospectivos observa-se uma associação inversa entre a concentração da lipoproteína de alta densidade (HDL) e risco de doença arterial coronariana (DAC). Uma das propriedades antiaterogênicas da HDL é sua participação no transporte reverso de colesterol (TRC). A proteína de transferência dos ésteres de colesterol (CETP) promove a troca de ésteres de colesterol (EC) e triacilglicerol (TAG) entre HDL e outras lipoproteínas, aumentando o colesterol das lipoproteínas apoB. Mutações/polimorfismos no gene da CETP foram detectados em várias populações, especialmente asiáticas. Apesar da menor atividade de CETP e hiperalfaliporpteinemia (HALP), interroga-se quanto a prevalência de doença cardiovascular (DCV) nestes indivíduos. o objetivo deste trabalho foi avaliar, em população de brasileiros HALP, a prevalência de mutações/polimorfismos do gene da CETP e manifestações bioquímicas e ateroscleróticas deste fenótipo. Foram determinados lípides, lipoproteínas e parâmetros metabólicos plasmáticos marcadores de DCV, numa população de 291 a 294 indivíduos HALP (HDL-C ~ 68mg/dl) e 139 controles (HDL-C < 68mg/dl). A prevalência das mutações Int14A e D442G e dos polimorfismos Taqill e 1405V,no gene da CETP, foi investigada por análise genôrnica. Aterosclerose nos pacientes com mutações/polimorfismos foi avaliada clinicamente e por medida da espessura íntima-média arterial (IMT) pela ultra-sonografia das carótidas. Na população HALP, HDL-C apresentou valor 1.5 maior do que controles. A prevalência da mutação Int14A no grupo HALP foi de 4%, baixa, porém maior do que a descrita em caucasianos, e de 0,7% na D442G, muito baixa e menor do que emjaponeses/asiáticos. No grupo HALP, verificou-se aumento das atividades de lipoproteína lipase (LPL) e da proteína de transferência de fosfolípides (pLTP) e redução de CETP e lipase hepática (HL). O grupo de mutantes (7 indivíduos) comparado ao controle, evidenciou tendência semelhante. A paciente homozigótica Int14A, apresentou atividade indetectável de CETP e reduzida de HL, além de HALP severa. Um dos pacientes, heterozigótico D442G, mostrou aumento do IMT em relação aos controles, e um dos heterozigóticos Int14A, DCV estabelecida. genótipo BIB2, do polimorfismo TaqIB, apresentou prevalência de 45% e o IV de I405V, 49%. Comparando os genótipos entre S4em B2B2 de TaqIB, encontrou-se aumento do IMT, diminuição de auto-anticorpos anti lipoproteína de baixa densidade oxidada (LDL-oxidada) e menor atividade de CETP. A atividade de CETP mostrou-se aumentada no genótipo II de I405V, com redução da HDL-C. As lipoproteínas, apolipoproteínas e lípides, foram semelhantes entre os diversos genótipos, bem como LPL, HL e PLTP. o fenótipo HALP caracterizado neste estudo por dimuição das atividades de CETP e HL e aumento de LPL e PLTP não demonstrou associação com a presença das mutaões e/ou polimorfismos estudados. É possível que a baixa fteqüência das mutações de CETP não nao tenha permitido caracterizar estatisticamente esta associação. Mutações de outras proteínas, como por exemplo de HL, poderiam explicar este fenótipo. Os indivíduos HALP, portadores de mutações, não mostraram diferença quanto a aterosclerose clínica e IMT em relação aos controles, apesar de alguns pacientes isoladamente apresentarem sinais clínicos de DCV. Estes resultados não permitiram caracterizar a condição de HALP como cardioprotetora ou não. Estudos complementares necessitam ser realizados para uma melhor compreensão do fenótipo de hiperalfalipoproteinernia no contexto do risco cardiovascular ateroscleróticoAbstract: There is an inverse association between the concentration of high density lipoprotein (HDL) and the risk of a coronary arterial disease (CAD). One ofthe HDL anti-atherogenic properties is its participation in the reverse cholesterol transport (RCT). The cholesteryl ester transfer protein (CETP) facilitates the cholesteryl esters (CE) and triglycerides (TAG) exchange between HDL and others lipoproteins, increasing the cholesterol content of apoB lipoproteins. Mutations and polymorphisms of the CETP gene were detected in several populations, especially among Asiatic. In spite of a lower activity of the CETP and an increase of the HDL-C leveI in hyperalphalipoproteinemia (HALP), there are some doubts in regard to the prevalence ofthe cardiovascular disease (CVD) in these population groups. The aim of this work was to evaluate the prevalence of HALP and its relationship to the presence ofmutations and polymorphisms ofthe CETP gene, in a Brazilian population, and its relation with the arteriosclerosis.We determined lipid, lipoproteins, metabolic plasmatic parameters and markers of CVD, in a population of 291 to 294 HALP individuaIs (HDL-C 2: 68mg/dl) and 139 controls (HDL-C < 68mg/dl). The prevalence of the mutations Int14A and D442G, and the polymorphisms TaqIB and 1405V, was investigated by molecular methods. The presence of atherosclerosis in those patients with mutations and polymorphisms and in controls, was evaluated by clínical analyzes and measurements of the arterial intima-media thickness (IMT) by ultrasound method was performed. HDL-C was 1.5 higher in the HALP when compared to controls. A very low prevalence equal to 0.7% was found for D442G mutations, lower than in the Asiatic and Japanese population, and 4% for Int14A mutations, higher than the one described in the Caucasians. On HALP, the activities of lipoprotein lipase (LPL) and phospholipid transfer protein (PLTP) were higher and activities of CETP and hepatic lipase (HL) were lower than in controls. The seven mutants presented similar tendencies. The homozygous Int14A, showed indetectable activity of CETP and a reduction of HL, besides very high values of HDL-C. The BIB2 TaqIB genotype presented a :&equencyequal to 45%, and the IV I405V to 49%. Comparing all genotypes, B2B2 TaqIB presented higher IMT, lower autoantibodies against oxidized low density lipoprotein (LDLox) and lower CETP activity. The II I405V showed a highest CETP activity and a lowest HDL-C value. The lipoproteins, lipids and apolipoproteins were equal among all genotypes, as well as activities of LPL, HL and PLTP. The HALP phenotype was characterized by lower CETP and HL activities and higher LPL and PLTP activities when compared with controls but with no association with mutations or polymorphisms studied. It is possible that the low :&equencyof CETP mutations made impossible this statistic association. Perhaps other mutations, like in HL gene, could explain this phenotype. The HALP mutants did not show a difference in c1inical atherosc1erosis and IMT as compared with controls, although some individuaIs presented clinical signs ofCVD. These results did not discard the possibility ofthe HALP phenotype as a cardioprotector or not. Complementary studies will have to done to amplify the investigation of other mutations and polymorphisms of CETP and or HL and to try to establish a relationship between HALP and atherosclerosisDoutoradoCiencias BiomedicasDoutor em Ciências Médica