Incidence and development of Salmonella spp. and Listeria spp. in fruit with low acidity

Orientador: Mauro Faber de Freitas LeitãoTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de AlimentosResumo: Numa etapa inicial, foi estudada a incidência de Sa/monella spp. e Usteria spp. em superfície de frutas de baixa acidez (melão, melancia e mamão). De um total de 120 amostras de frutas, 42 foram analisadas simultaneamente por um método imunoenzimático (TECRA VIA) e outro clássico, de referência (BAM modificado) para Salmonella e por um método canadense "Health Protection Branch" e TECRA VIA para Lísteria. As 78 amostras de frutas restantes foram analisadas somente pelos métodos de cultura. Salmonella spp. não foi detectada em nenhuma das amostras analisadas pelos dois métodos utilizados, o mesmo ocorrendo em relação ao isolamento de L. monocytogenes. No entanto, Usteria innocua e Usteria grayii foram isoladas a partir de três amostras de melancia, L. ivanovii em cinco amostras de mamão e L. we/shimeri em uma amostra de melão, quando utilizado o método canadense "Health Protection Branch". Observou-se, também, que as amostras coletadas em feiras livres mostraram uma maior incidência de Usteria spp. quando comparadas com aquelas obtidas em centrais de abastecimento (CEASA). Numa segunda etapa do projeto, estudou-se a capacidade de multiplicação de Sa/monella Enteritidis e Usteria monocytogenes em polpas de frutas (mamão, melão e melancia) incubadas em diferentes condições de tempo e temperatura. Os respectivos tempos de geração (g) para Sa/mone//a Enteritidis, nas temperaturas de 10°C, 20 °C e 30°C foram de 7,31, 1,69 e 0,69 horas em melão de 7,47,1,60 e 0,51 horas em melancia e de 16,61,1,74 e 0,66 horas em mamão. Já para Usteria monocytogenes os tempos de geração em melão, melancia e mamão foram, respectivamente, de 7,12, 13,03 e 15,05 horas a 10°C; 1,74,2,17 e 6,42 horas a 20°C e 0,84, 1,00 e 1,16 horas a 30°C. Os resultados mostraram que tanto S. Enteritidis como L. monocytogenes podem multiplicar-se em frutas de baixa acidez e que a temperatura de 10°C, apesar de reduzir a velocidade de crescimento destes microrganismos não garante a inibição dos mesmos. Numa terceira etapa, estudou-se a possibilidade de infiltração de Salmonella Enteritidis sorotipo S 132 fluorescente em mangas após serem submetidas a tratamento hidrotérmico para eliminar larvas de moscas das frutas. Este estudo foi conduzido na Food and Drug Administration - FDAlUSA Os resultados evidenciaram, indiretamente, a capacidade de infiltração microbiana nas frutas, utilizando-se o corante "Brilliant blue FCF/Sigma", que foi detectada em 67% das frutas submetidas ao tratamento; nos ensaios efetuados diretamente com Salmonella Enteritidis fluorescente os níveis de infiltração foram elevados, de 87%, tanto para mangas verdes como maduras. Constatou-se, também, que a infiltração da bactéria foi muito mais acentuada na região do cálice da manga do que na sua porção lateral ou na baseAbstract: In the first part of the project, the incidence of Salmonella spp. and Listeria spp. on the surface of low acid fruits (melon, watermelon and papaya) was studied. From the total of 120 fruit samples 42 were simultaneously analyzed by the TECRA Visual Immunoassay (TECRA VIA) and the modified BAM for Salmonella and by the Health Protection Branch, Canada, and TECRA VIA for Listeria; the remaining 78 fruit samples were analyzed only by the cultural procedures. Salmonella spp. was absent in ali the samples analyzed using both methods as was L. monocytogenes. However, L. innocua and L. grayii were detected in watermelon samples, L. ivanovii in papaya samples and L. welshimeri in melon .samples when using the Health Protection Branch method. It was also observed that the samples collected in street markets showed a higher incidence of Usteria spp. when compared to those collected in wholesale markets. In the second part of the project, the ability of Salmonella Enteritidis and Listeria monocytogenes to grow in fruit pulp (melon, watermelon and papaya) incubated under different conditions of time and temperature, was studied. The generation times (g) for S. Enteritidis in melon at 10°C, 20 °C and 30°C were 7.31, 1.69 and 0.69 h respectively; for watermelon 7.47, 1.60 and 0.51 h respedively and for papaya 16.61, 1.74 and 0.66 h respectively. For L. monocytogenes the generation times for melon, watermelon and papaya were 7.12, 13.03 and 15.05 h at 10°C respectívely, 1.74,2.17 and 6.42 h at 20°C and 0.84,1.00 and 1.16 h at 30°C. The results showed that both S. Enteritidis and L. monocytogens could grow in low acid fruits and that a temperature of 10°C, although capable of reducing the rate of growth of these microorganisms, could not guarantee their inhibition. In the third part of this project the possibility of the infiltration of S. Enteritidis into mangoes (after being submitted to hot water treatment to eliminate fly larvae), was studied. This project was carried out at the Food and Drug Administration-FDA in the USA Using a dye (Brilliant blue FCF/Sigma), the results showed the ability of the microorganism to infiltrate the mangoes, which was detected in 67% of the fruits submitted to the treatment. In the experiments performed directly with S. Enteritidis fluorescent serotype S 132, the infiltration levels were higher (87%) both for green and early-ripened mangoes. It was also observed that bacterial infiltration was more evident in the stem portion when compared to the bottom and middle portionsDoutoradoDoutor em Tecnologia de Alimento