Aspectos farmacologicos do infiltrado leucocitario induzido pelo veneno de Bothrops lanceolatus na cavidade peritoneal de camundongos

Orientador: Albetiza Lobo de AraujoDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências MédicasResumo: No presente trabalho investigou-se a capacidade do veneno de Bothrops lanceolatus (VBL) em induzir a migração de neutrófilos para a cavidade peritoneal de camundongos. A injeção intraperitoneal do veneno causou um aumento na migração de neutrófilos tempo-dependente, com pico máximo 4 horas após a injeção, na dose de 750 ng/cavidade. A capacidade do veneno em induzir a migração de neutrófilos foi reduzida significativamente, quando os animais foram pré-tratados com dexametasona (inibidor indireto da fosfolipase A2; 0,5 mg/kg, s.c.,) ou AA 861 (inibidor da 5-lipoxigenase; 0.1 mg/kg, s.c.). O tratamento dos animais com indometacina (inibidor não seletivo da cic1ooxigenase; 5 mg/kg, s.c.), meloxicam (inibidor da COX-2; 5 rng/kg, s.c.) ou WEB 2086 (antagonista do PAF; 40 rng/kg, s.c.) não reduziu a migração de neutrófilos. Dexametasona e AA 861 também inibiram a migração de neutrófilos, quando administradas imediatamente após a injeção do veneno. A possibilidade da migração de neutrófilos ser causada pela contaminação com endotoxina bacteriana foi eliminada uma vez que o tratamento do veneno com polimixina B não reduziu a migração. O aquecimento do veneno (97°C, 2 min) reduziu a atividade fosfolipásica e esta foi acompanhada por uma redução na migração de neutrófilos O agente quelante EDT A reduziu parcialmente a migração de neutrófilos e a atividade fosfolipásica do veneno. Entretanto, outros componentes do veneno podem estar envolvidos na migração, visto que houve redução de apenas 30% na migração de neutrófilos com a atividade fosfolipásica do veneno totalmente abolida. Os resultados sugerem que metabólitos da lipoxigenase estão envolvidos no processo quimiotático observado, e que macrófagos residentes peritoneais são células importantes no processo, uma vez que a migração de neutrófilos foi potencializada em animais pré-tratados com tioglicolato, mas reduziu-se quando a cavidade peritoneal foi lavada com salina estérilAbstract: The ability of Bothrops lanceolatus venom (BLV) to induce neutrophil migration into the peritoneal cavity of mice was investigated. Intraperitoneal injection of venom caused time-dependent neutrophil migration, which peaked with 750 ng of BLV/cavity 4 h after venom injection. The venom-induced neutrophil migration was significantly reduced by pretreatment with dexamethasone (0.5 mg/kg, s.c), an indirect inhibitor of phospholipase A2 (PLA2), and AA861 (0.1 mg/kg, s.c), a 5-lipoxygenase inhibitor. In contrast, the neutrophil migration was not modified by pretreatment with indomethacin (2 mg/kg, s.c), an inhibitor of the cyclooxygenase pathway, meloxicam (5 mg/kg, s.c), an inhibitor of the cyclooxygenase-2 pathway, or the PAF inhibitor WEB2086 (40 mg/kg, s.c). Dexamethasone and AA861 also inhibited the neutrophil migration by 60% and 70%, respectively when administered immediately after venom injection. BLV induced neutrophil migration was not due to contamination by endotoxin since polymyxin B-treated BLV retained its activity. Heating the venom (97°C, 2 min) reduced the PLA2 activity and this was accompanied by a corresponding reduction in neutrophil migration. The chelating agent EDTA partially reduced the neutrophil migration and the venom phospholipase activity. Thus, other components in BLV must contribute to the observed effect, since the neutrophil migration was reduced by 30% when the PLA2 activity was abolished. These results suggest that arachidonate-derived lipoxygenase metabolities are involved in the chemotaxis observed. Macrophages may be an important cell, since the migratory response to BLV was potentiated in mice pretreated with thioglycollate, but reduced when the peritoneal cavity was washed with sterile salineMestradoMestre em Farmacologi