Efeito do imunoestimulador 8bromoguanosina no tratamento da leishmaniose murina

Orientador: Selma GiorgioDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo: A capacidade imunoestimulatória dos ribonucleosídeos sintéticos com substituições nas posições 7 e/ou 8 foi comprovada em experimentos in vitro e tratamentos experimentais. Diante da evidência de que os parasitas do gênero Leishmania infectam macrófagos, possuindo um complexo mecanismo de escape e, não raro, os tratamentos convencionais são ineficientes, o objetivo deste trabalho foi testar a possibilidade da utilização do ribonucleosídeo 8-Bromo-Guanosina (8BrGuo) no tratamento da leishmaniose utilizando o modelo murino. Testes in vitro comprovaram que este composto ativa macrófagos murinos infectados com formas amastigotas de Leishmania (L.) amazonensis, diminuindo a infecção em cerca de 70%. Também foram realizados experimentos in vitro com o objetivo de avaliar o mecanismo de ação deste composto na ativação de macrófagos e destruição dos parasitas. Foi analisada a produção de nitrito, um subproduto do óxido nítrico, composto com capacidade oxidativa e tóxica a microrganismos. Para os testes in vivo, com camundongos de linhagem isogênica CBA/J, utilizamos diferentes vias de inoculação e apresentação de 8BrGuo, sendo que o processo mais eficiente e menos agressivo foi o intraperitoneal e a melhor resposta foi em solução utilizando Tween 80® como adjuvante. Paralelamente, investigamos as dosagens de 8BrGuo, sendo que algumas mostraram resultados estatisticamente significativos relacionados à diminuição da infecção. Observamos que o composto mostrou toxicidade nas doses mais elevadas. Mas análises histológicas mostraram que o composto 8BrGuo não provocou alterações teciduais hepáticas e renais 24 horas após o tratamento, nem após 60 dias. Testes bioquímicos de enzimas sangüíneas (transaminase glutâmico pirúvica e transaminase glutâmico oxaloacética), creatinina e hemograma completo mostraram-se normais quando comparados a animais controles. Podemos afirmar, inicialmente, que existe a possibilidade de tratamento da leishmaniose com a 8BrGuo. Contudo ainda há necessidade de maiores avaliações deste composto quanto aos comportamentos farmacocinéticos e farmacodinâmicoAbstract: Immunostimulatory ability of nucleosides substituted in either C8 or C8 and N7 positions has been tested in experimental in vitro treatments. Species belonging to the Leishmania genus parasitize macrophages displaying complex immune mechanism of escape, and treatments of leishmaniasis is often inefficients. The aim of this project was to test the 8BromoGuanosine (8BrGuo) in the treatment of cutaneous leishmaniasis in a murine model. The first tests confirmed that 8BrGuo ativated murine macrophages infected with Leishmania (L.) amazonensis amastigotes in vitro leading to 70% of infection reduction. In order to study the action mechanism of 8BrGuo in the parasite destruction inside the macrophages, another in vitro experiments were carried out, such as the production of nitrite, a subproduct of niric oxide, a powerful oxidative and toxic compound for microrganisms. These results encourage us to continue the investigations with 8BrGuo and isogenic mice CBA/J were for in vivo tests. Different administration routes of 8BrGuo were evaluated and the intraperitoneal route showed to be the most efficient and less agressive to the animals tested. Treatment with 8BrGuo and Tween® as na adjuvant led to statistically significant decrease of L. (L.) amazonensis lesions. Although the drug presented animal toxicity at high doses, at concentrations of 8BrGuo used in the present work it was not observed tissue damages in liverand kidney from treated CBNJ mice. Our results suggest that 8BrGuo induced a therapeutic effect during the leishmaniasis infection in murine model. Future studies concerning time assimilition, half time, elimination, and degradation of 8BrGuo will provide additional clues for the function and potential use of this compound as a therapeutic agent against leishmaniasisMestradoMestre em Parasitologi