Sinalização da insulina em sistema nervoso central de ratos

Orientadores: Licio Augusto Velloso, Mario Jose Abdalla SaadTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Ciencias MedicasResumo: A insulina, agindo através do seu receptor (IR) pertencente à família dos receptores com atividade tiro sina quinase, desencadeia uma série de respostas tecido-específicas mediadas por diferentes vias intracelulares. Uma destas vias, com atividade predominantemente ligada a crescimento celular e mitogênese envolve as proteínas SHC e GRB2. No presente estudo avaliou-se a sinalização da insulina através da vias SHC/GRB2 em sistema nervoso central (SNC) de ratos. Inicialmente determinou-se presença e quantidades de IR, SHC e GRB2 em córtex cerebral e cerebelar. As três proteínas foram encontradas em concentrações similares em ambos os tecidos. Entretanto, quando os animais experimentais foram submetidos a tratamento agudo com insulina detectou-se aumento significativo da fosforilação de IR e SHC e da associação SHC/GRB2 somente em cerebelo e não em córtex cerebral. Em seguida avaliou-se a variação da concentração de IR, SHC, GRB2 e da tirosina fosfata'Se SHP2, desde o primeiro dia até a sexagésima semana de vida. Com relação ao nível de expressão protéica somente SHP2 sofreu queda significativa no período avaliado, mantendo-se as demais proteínas em níveis estáveis. Sob tratamento agudo com insulina observou-se que no decorrer do período avaliado ocorreu uma queda progressiva da fosforilação basal ou insulino-dependente de IR e SHC e da associação entre SHC/GRB2 tanto em cérebro quanto em cerebelo. Conclui-se que elementos participantes de uma das vias intra-celulares de sinalização da insulina estão presentes em SNC, que sua atividade sofre modulação de acordo com a idade e que existem diferenças funcionais entre córtex cerebral e cerebelar na resposta à insulinaAbstract: Insulin, acting through its protein tyrosine kinase receptor (IR), induces a series of tissue specific responses that are mediated by different intracelIular pathways. One of these pathways, which promotes mitogenic and growth-related effects involve SHC and GRB2. In the present study insulin signaling was evaluated through the SHC/GRB2 pathway in the central nervous system (CNS) of rats. InitialIy we determined the presence and amounts of IR, SHC and GRB2 in forebrain cortex and cerebelIum. AlI three proteins were found at similar concentrations in both tissues. However, when the experimental animaIs were submitted to treatment withinsulin we found significant increase in IR and SHC phosphorylation and SHC/GRB2 association only in cerebelIum, but not in forebrain cortex. Next we determined the IR, SHC, GRB2 and SHP2 concentrations during postnatal development. Conceming protein expression, only SHP2 was shown to suffer a progressive falI from day one to week sixty of life. When acutely treating with insulin, we observed a progressive, time-dependent decrease on both basal and insulin-stimulated phosphorylation of IR and SHC and SCH/GRB2 association in forebrain cortex and cerebelIum. We conclude that, the elements involved in the intracelIular pathway of insulin signaling are present in the CNS, their functional status suffer variation with age and there is a site-specific variation in the response to insulinDoutoradoClinica MedicaDoutor em Clínica Médic