Efeito de desmineralizadores (TCA e EDTA) sobre proteinas de ultra-estrutura do pancreas e da glandula submandibular de camundongos injetados com 3H-Glicina

Orientador: Cassio Odnei Garcia MunhozDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de PiracicabaResumo: Neste estudo, procurou-se, através do método radioautográfico, observar os efeitos do EDT A a 4,13% e do TCA a 5% sobre as proteínas contidas nas secreções das células acinosas do pâncreas, nas células seromucosas da glândula submandibular e sobre a ultra-estrutura dessas glândulas de camundongos injetados com uma única dose de 3H-glicina e sacrificados uma hora após a injeção. As glândulas de cada animal foram divididas em pequenos fragmentos e estes, separados em 3 grupos: controles (não tratados), tratados pelo TCA e tratados com EDTA. As reações radioautográficas foram quantificadas mediante a contagem de grãos de prata reduzida sobre a secreção localizada na porção apical das células pancreáticas e sobre a secreção das células seromucosas da glândula submandibular. Os dados obtidos após as contagens dos grãos de prata mostraram, após a análise de variânciB, que não há diferenças significantes entre os três grupos. Conclui-se, assim, que tanto o TCA como o EDT A não provocam extrações de proteínas marcadas nas secreções. O TCA tem sobre o EDT A a vantagem de remover os sais minerais num intervalo de tempo mais curto, porém, a obtenção dos cortes semi-fmos no material tratado por ele é bem mais dificil. Ao microscópio eletrônico, o material tratado pelo EDT A apresenta o mesmo aspecto do controle. O TCA, ao contrário, provocou muitas alterações da ultra-estrutura de vários componentes celulares. Ao contrário do EDT A, seu uso como agente desmineralizador de tecidos duros em estudos ultra-estruturais não deve ser recomendadoAbstract: The aim of this study was to observe radioautographicaIly the effects of TCA and EDT A on the secretory proteins of the serous pancreatic cells, on the seromucous submandibular gland cells and on the ultrastructure of these glands of mice sacrificed lh afier the injection of a single dose of 3H-glicine by intracardiac fixation with 4% p-formaldehyde solution. The glands of each animal were divided in smaIl fragments (about lmm3) which were separated in three groups: control (non treated), treated with TCA and 1reated with EDT A. The radioautographic reactions were quantified by counting the reduced silver grains over the secretion of the serous pancreatic and seromucous submandibular gland cells. The counting data, afier statistical variance analysis, showed that both TCA and EDT A did not extract the labelled proteins of the acinar cells secretions of pancreas and submandibular glands. Although TCA removed the mineraIs faster than the EDT A it was more difficult to obtain ul1ra-thin and semi-thin sections in the gland fragments treated with it. Also the staining of the acinar cells with methilene blue was impaired. . The fragments treated by the EDT A did not present significant ul1rastructural differences when compared with controls. The TCA, on the other hand, caused some damage to the fine structure of various cellular components. Therefore, its use as a decalcitier of hard tiSsues on ultrastructural studies should not be recommended.MestradoHistologia e EmbriologiaMestre em Biologia Buco-Denta