Atividade de anticorpos especificos nas propriedades ligantes da hemoglobina extracelular de Glossoscolex paulistus (Oligochaeta, Glossoscolecidae)

Orientador: Benedito de OliveiraDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo: Eritrocruorinas são proteínas - respiratórias responsáveis pelo transporte de oxigênio,- possuem peso molecular acima de 3x¿10 POT. 6¿ e estão presentes na hemolinfa de anelídeos. O espectro característico da eritrocruorina de Glossoscolex paulistus em ensaios de Equilíbrio com o Oxigênio mostra a oxieritrocruorina com um pico máximo de absorção a 419 nm, e sua forma deoxigenada com um pico máximo a 428 nm. Este comportamento é modificado pelo efeito de antisoro de coelhos específico, por IgG específica e por fragmento Fab específicos,- revelando urna alteração do espectro de absorção da eritrocruorina por um desvio para a esquerda das Curvas no ¿Plot de Hill". Este desvio demonstra uma afinidade aumentada da hemeproteína pelo oxigênio. Não foram observadas modificações do espectro da eritrocruorina sozinha ou na presença de soro de carneiro não imunizado. A concentração de proteínas dos diferentes soros foi ajustada, na intenção de se obter quantidade, similar de proteína. Por outro lado, urna diminuição na afinidade pelo oxigênio é observada quando são usadas grandes quantidades de proteínas totais do soro - talvez devido à interação não específica de proteínas outras que não IgG, existentes no soro total específicoAbstract: Erythrocruorins are respiratory proteins responsible for the oxygen transport, having molecular weight over 3x¿10 POT. 6¿, present in the haemolymph of annelids. The caracteristic spectrum of the erythrocruorin from Glossoxolex paulistus in a Oxygen Equilibrium assay shows the oxyerythrocruorin with a maximum absortion peak at 419 nm ant the deoxygenated form with a maximum at 428 nm. This behavior is modified by the effect of a whole specific antiserum raised in rabbits, by specific IgG antibodies and by specific Fab fragments, showing an alteration of the erythrocruorin spectrum by a deviation to the left of the Hill Plot Curves. This deviation denotes an increasing affinity to the oxygen of the hemeprotein. No differences in the spectrum of the erythrocruorin were detected with erythrocruorin alone, or in the presence of whole serum of a non-immunized sheep. Protein concentration of the different sera were adjusted, in order to have a similar amount of protein. On the other hand, a decreased affinity to the oxygen is observed when larger amounts of the whole serum protein are use - perhaps due to non-specific interaction of non IgG rnolecules of the whole specif antiserumMestradoImunologiaMestre em Ciências Biológica