The significance of the expression of cell proliferation and inflammation markers in the development of acquired middle ear cholesteatoma

Apstrakt: Ciljevi. Konstantna proliferacija i periodične infekcije su glavne kliničke karakteristike stečenog holesteatoma srednjeg uva. Cilj ove studije bio je da se istraže imunohistohemijske karakteristike holesteatoma i tkiva obližnje kože i tako prostudira etiologija i razvoj stečenog holesteatoma srednjeg uva. Metode. Istraživali smo kliničke, histološke i imunohistohemijske karakteristike holesteatoma 50 operisanih bolesnika sa stečenim holesteatomom srednjeg uva. Klasifikovali smo sve uzorke prema kliničkim karakteristikama holesteatoma kao što su destrukcija kosti, prisustvo infekcije ili proširenost holesteatomskog procesa i histološkim karakteristikama holesteatoma kao što su keratinizacija, inflamatorna infiltracija i ekstraćelijska proliferacija matriksa. Koristili smo primarna monoklonska antitela za PCNA, Ki-67, COX-2, CD 4 i CD 8 limfocita da bi istražili ekspresiju ovih karakteristika u holesteatomu i u kontrolnom tkivu kože. Statističke analize su izvedene korišćenjem SPSS za Windows, verzija 16.0 (SPSS, Chicago, IL, USA). Koristili smo T-test za nezavisne grupe, Spirmanovu analizu korelacije i Mann-Whitney U test za analizu statističkih rezultata i standardni statistički metod aritmetičke sredine. Rezultati. Ekspresija PCNA, Ki-67, COX-2 i CD 8 limfocita u holesteatomima sa težom kliničkom slikom je bila podjednaka kao u holesteatomima sa lakšom kliničkom slikom. Statistički značajno visoka koncentracija CD-4 limfocita bila je u uzorcima stečenog holesteatoma i u uzorcima kože koštanog dela spoljašnjeg slušnog hodnika, u blizini fibrokartilaginoznog anulusa u holestetomima sa težom kliničkom slikom nego u holesteatomima sa lakšom kliničkom slikom (r < 0,05). Postojala je statistički značajna razlika ekspresije PCNA, Ki-67, COX-2, CD-4 i CD 8 limfocita između uzorka holesteatoma i uzoraka kože koštanog dela spoljašnjeg slušnog kanala svih operisanih pacijenata (r <0,05) i statistički značajna razlika u ekspresiji PCNA, Ki-67, COX-2, CD-4 i CD 8 limfocita u koži koštanog dela spoljašnjeg slušnog hodnika u odnosu na retroaurikularnu kožu (r <0,05).Аbstract: Objectives. Permanent proliferation and periodical infection are the main clinical characteristics of acquired middle ear cholesteatoma. The aim of this study was to research immunohistochemical characteristics of the skin, cholesteatoma processes in the nearby tissue to study etiology and development of acquired middle ear cholesteatoma. Methods. We investigated clinical, histological and immunohistochemical characteristics of cholesteatoma in 50 samples from operated patients with acquired middle ear cholesteatomas. We classified all samples according to their clinical characteristics of cholesteatoma such as bone destruction, presence of infection or cholesteatoma extension and histological characteristics of cholesteatoma such as keratinisation, inflammatory process and extra cellular matrix proliferation. We used MAbs for PCNA, Ki-67, COX-2, CD 4 and CD 8 lymphocytes to investigate the expression of those characteristics in the cholesteatoma and in the control skin tissue. Statistical analyses were performed using SPSS for Windows version 16.0 (SPSS,Chicago, IL, USA). We used the independent group T-test, Spearman correlation analysis and Mann-Whitney U test to analyze statistical results and the standard statistical method of arithmetical average. Results. Expression of PCNA, Ki-67, COX-2 and CD 8 lymphocytes in more serious clinical picture of cholesteatoma was almost equal as in less serious clinical picture of cholesteatoma. There is statistically significant high concentracion of inflammation markers CD 4 lymphocytes both, in the acquired cholesteatoma and in the skin of bony portion of the external auditory canal, nearby fibrocartilaginous anulus in more serious clinical picture of cholesteatoma than in less clinical serious picture of cholesteatoma (p<0.05). There is statistically significant difference of expression of PCNA, Ki-67, COX-2, CD 4 and CD 8 lymphocytes between all cholesteatoma samples and the skin of bony portion of the external auditory canal (p<0.05) and statistically significant difference of expression in the skin of bony portion of the external auditory canal than in the retroauricular skin (p