Chemical study and antifungal activity of essential oils of two species of Psidium L., as a function of seasonality and in different phenological phases

A família Myrtaceae está entre uma das mais representativas dos ecossistemas brasileiros. A presença de estruturas secretoras de óleos essenciais nos órgãos vegetativos e reprodutivos destas espécies é uma característica marcante da família. O conhecimento dos fatores que determinam a variabilidade química de cada espécie vegetal é muito importante para investigações químicas e farmacológicas. Esse estudo tem como objetivo avaliar a variabilidade química dos óleos essenciais de Psidium myrtoides e Psidium salutare, em diferentes fases fenológicas e períodos sazonais, além de verificar esta variação na atividade antifúngica. As fenofases vegetativa (queda foliar e brotamento) e reprodutiva (floração e frutificação) foram observadas como presente ou ausente durante dois anos. Para analisar a variabilidade dos constituintes químicos da espécie foram realizadas coletas trimestrais durante os anos de 2016 e 2017, compreendendo as fases vegetativas e reprodutivas e as estações chuvosa e seca. Os óleos essenciais das folhas foram obtidos pelo processo de hidrodestilação em aparelho tipo Clevenger e quantificados por Cromatografia Gasosa acoplado à Espectrometria de Massa (CG/EM). Os testes antifungicos foram realizadas contra linhagens fúngicas de Candida albicans, C. tropicalis e C. krusei pelo método de microdiluição em caldo para determinação da concentração fungicida mínima (CFM) a partir do subcultivo. Os óleos essenciais (CFM/16) foram associados ao fluconazol para verificação de efeito potencializador. O efeito sobre o dimorfismo de Candida albicans foi avaliado por microscopia optica em câmaras de microcultivo. Os óleos essenciais durante os dois anos de estudo, apresentaram rendimentos variando de 0,15 a 0,75% para P. salutare e de 0,35 a 1,17% para P. myrtoides, com maiores valores no período reprodutivo associada a estação chuvosa. Foram identificados 33 constituintes em P. myrtoides e 40 para P. salutare, cujos componentes marjoritários foram 1-8 cineol e γ-terpineno, respectivamente. Observou-se variabilidade na composição e concentração dos compostos, influenciada pela sazonalidade e/ou pela fenofase. Os óleos essenciais não apresentaram atividade antifúngica significativa, em ambas as espécies, mais potencializaram o efeito do antifungico cormecial (fluconazol) em todos os períodos de coleta. Os óleos essenciais afetaram a transição morfológica de C. albicans em concentrações crescentes. Os resultados demonstraram que plantas amostradas em diferentes períodos fenológicos ou sazonais apresentam composições diferentes e, consequentemente, tiveram vaiações nos constituintes bioativos, que em parte, podem está relacionada a atividade biológica. Embora sejam produtos naturais de plantas diferentes, o efeito biológico revelado indica que as espécies do gênero Psidium podem ser um agente em potencial no combate a virulência de fungos de Candida spp., destinados a possíveis usos terapêuticos.The Myrtaceae family is among one of the most representative of Brazilian ecosystems. The presence of secretory structures of essential oils in the vegetative and reproductive organs of these species is a hallmark of the family. Knowledge of the factors that determine the chemical variability of each plant species is very important for chemical and pharmacological investigations. This study aims to evaluate the chemical variability of the essential oils of Psidium myrtoides and Psidium salutare, in different phenological phases and seasonal periods, besides verifying this variation in antifungal activity. The vegetative (foliar and budding) and reproductive (flowering and fruiting) phenotypes were observed as present or absent for two years. To analyze the variability of the chemical constituents of the species, quarterly collections were made during the years 2016 and 2017, including the vegetative and reproductive phases and the rainy and dry seasons. Leaf essential oils were obtained by hydrodistillation in a Clevenger type apparatus and quantified by Gas Chromatography coupled to Mass Spectrometry (GC / MS). The antifungal tests were carried out against fungal strains of Candida albicans, C. tropicalis and C. krusei by broth microdilution method to determine the minimum fungicidal concentration (CFM) from the subculture. Essential oils (CFM / 16) were associated with fluconazole for potentiating effect. The effect on Candida albicans dimorphism was evaluated by optical microscopy in microculture chambers. The essential oils during the two years of study presented yields varying from 0.15 to 0.75% for P. salutare and from 0.35 to 1.17% for P. myrtoides, with higher values in the reproductive period associated with the season rainy A total of 33 constituents were identified in P. myrtoides and 40 in P. salutare, whose major components were 1-8 cineol and γ-terpinene, respectively. Variability in composition and concentration of the compounds was observed, influenced by seasonality and/ or phenophases. The essential oils did not present significant antifungal activity in both species, but they potentiated the effect of the antifungal agent (fluconazole) in all the collection periods. The essential oils affected the morphological transition of C. albicans in increasing concentrations. The results showed that plants sampled in different phenological or seasonal periods have different compositions and, consequently, had vaiations in the bioactive constituents, which in part, may be related to biological activity. Although they are natural products of different plants, the biological effect revealed indicates that species of the genus Psidium may be a potential agent in combating the virulence of fungi of Candida spp., Destined to possible therapeutic uses.Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPqCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPE