Avaliação de espermatozoides ovinos criopreservados em Tris-gema acrescido de antioxidantes enzimáticos e não-enzimáticos

Objetivou-se com este trabalho avaliar o efeito da adição dos antioxidantes superóxido dismutase (SOD), glutationa reduzida (GSH), catalase (CAT), vitamina E (Trolox), e a associação entre CAT e SOD ao diluente Tris-gema de congelação do sêmen ovino. Foram utilizados cinco reprodutores ovinos da raça Santa Inês, com histórico de fertilidade, sendo os ejaculados obtidos pelo método de vagina artificial. Os ejaculados foram avaliados e submetidos à formação do pool, diluído em Tris-gema e glicerol 5%, acrescido de antioxidantes de acordo com o experimento e o grupo experimental: Exp. 1 (G1= Controle; G2= 25 U/mL de SOD; G3= 50 U/mL de SOD; G4= 100 U/mL de SOD; G5= 2 mM de GSH; G6= 5 mM de GSH; G7= 7 mM de GSH) e Exp. 2 (G1= Controle; G2= 30 μM de Trolox; G3= 60 μM de Trolox; G4= 120 μM de Trolox; G5= 25 U/mL de CAT; G6= 50 U/mL de CAT; G7= 100 U/mL de CAT; G8= 25 U/mL de CAT + 100 U/mL de SOD), na concentração de 240 x 106 espermatozoides/mL. O sêmen foi acondicionado em palhetas (0,25 mL), congelado utilizando sistema automatizado e armazenado em nitrogênio líquido (- 196 ºC). Após descongelação (37 oC/30 segundos), as amostras foram submetidas à análise de integridade da membrana plasmática (iMP), acrossoma (iAc) e potencial de membrana mitocondrial (PMM) com sondas fluorescentes; cinética espermática, pelo CASA; e ultraestrutura dos espermatozoides, por microscopia eletrônica de transmissão. No Exp. 1, foi realizada avaliação in vivo, com o sêmen utilizado em programa de transferência de embriões. Diferenças significativas (P0.05). For Exp 2, CAT 100 U/mL showed a lower percentage (P<0.05) of spermatozoa with intact acrosome. Significant differences (P<0.05) were observed among groups on the kinematics sperm (progressive motility, linearity, straightness, oscillation index, straight line velocity and velocity average path), and were higher for Trolox (30 and 60 μM) and lower for CAT (50 and 100 U/mL). On ultrastructural evaluation, CAT (50 and 100 U/mL) had lower acrosome preservation (P<0.05) and CAT 25 U/mL was higher (P