Desenvolvimento de biossensor microbiano de metal pesado utilizando Saccharomyces cerevisiae como modelo de estudo

As técnicas analíticas convencionais para detecção de metais pesados, como espectrometria de absorção atômica, são precisas, porém possuem um custo elevado e necessitam de certa capacitação para serem utilizadas. Biossensores microbianos possuem uma série de vantagens frente à técnicas convencionais como especificidade, baixo custo, portabilidade, vida útil mais longa, maior tolerância a variações de pH e temperatura, além de serem mais baratos que enzimas e anticorpos. Neste estudo, utilizando a levedura S. cerevisiae como modelo, foi verificado o potencial biossensor de uma linhagem mutante dessa levedura baseado no promotor PvSR2 (Stress-Related gene number 2 de Phaseolus vulgaris), que responde especificamente a vários metais pesados, entre eles cádmio e mercúrio. Para a construção de tal biossensor, foram utilizados vetores plasmidiais com dois genes repórteres, lacZ e GFP, sob regulação do promotor PvSR2 , onde estes foram transformados em S. cerevisiae BY4741, gerando duas linhagens mutantes. Para avaliar a capacidade de resposta das leveduras recombinantes à presença de metais pesado, tais células foram expostas a concentrações crescentes de Cd2+ e posteriormente avaliada a atividade β-galactosidase e a fluorescência nas mutantes contendo os genes repórteres lacZ e GFP, respectivamente