Desenvolvimento, caracteriza??o e avalia??o de nanoestruturas contendo fotosensitizador para o tratamento de les?es malignas e potencialmente malignas em modelos experimenteis.

Programa de P?s-Gradua??o em Ci?ncias Farmac?uticas. CIPHARMA, Escola de Farm?cia, Universidade Federal de Ouro Preto.Neste trabalho o fotossensitizador, cloro alum?nio ftalocianina (AlClPc), foi incorporado em diferentes sistemas coloidais: nanoc?psulas (NC) convencionais de ?cido poli-D,L-l?tico (PLA), NC estericamente estabilizadas ou peguiladas com monometoxipolietilenoglicol-co-poli-D,L-lact?deo (PLA-PEG) e em nanoemuls?es (NE) ani?nicas e cati?nicas utilizando-se a metodologia de precipita??o seguida de evapora??o do solvente. NC de PLA e PLA-PEG contendo AlClPc foram desenvolvidas e caracterizadas para o tratamento intravenoso de tumores s?lidos em modelo animal usando a terapia fotodin?mica (TFD). As prepara??es de NC contendo AlClPc mostraram estreita distribui??o de tamanho (monodispers?o) com um ?ndice de polidispers?o m?dio de 0,13. O di?metro m?dio, determinado por espectroscopia de correla??o de f?tons (ECF), variou em torno de 200 nm conforme a formula??o e todas as formula??es apresentaram potencial zeta negativo. A porcentagem de encapsula??o de AlClPc foi pr?xima de 100% para todas as formula??es. O perfil de libera??o foi investigado para as nanoestruturas e foi observada uma libera??o prolongada por 168 horas. A hem?lise induzida pelo AlClPc livre ou pelo AlClPc-NC PLA foi baixa (< 10%), sendo que as NC PLA-PEG contendo AlClPc induziram maior hemotoxicidade (m?ximo de 37 %). A atividade antitumoral de AlClPc livre e incorporado em NC PLA e NC PLA-PEG foi avaliada em modelo murino de tumor s?lido de Ehrlich, nas doses de 0,5 e 6,0 mg/kg de AlClPc e na dose de luz de 50 J/cm2. Os grupos controles apresentaram padr?es macrosc?picos e histol?gicos similares, enquanto, os tratados por terapia fotodin?mica induziram 70% e 68% de necrose no tumor ap?s uma ?nica aplica??o de NC PLA e NC PLA-PEG nas doses mais altas de AlClPc, respectivamente, mostrando efic?cia de NC-AlClPc no tratamento experimental por PDT em nosso modelo animal. Por outro lado, NE e NC ani?nicas e cati?nicas foram desenvolvidas e caracterizadas para utiliza??o no tratamento t?pico de desordens potencialmente malignas da mucosa oral, visando aplica??es no tratamento futuro da leucoplasia. Nanoestruturas cati?nicas compostas de estearilamina (EA) ou dodecilamina (DA) foram preparadas por nanoemulsifica??o espont?nea. O procedimento resultou em NE monodispersas com di?metro m?dio das got?culas de aproximadamente 273 nm. NC tamb?m foram preparadas e comparativamente apresentaram tamanho m?dio muito semelhante (263 nm). As nanoestruturas compostas de DA e EA apresentaram um potencial zeta de +17 e +76 mV, respectivamente. AlClPc-carregada em nanoestruturas cati?nicas exibiram porcentagem de encapsula??o de 100%. A porcentagem de AlClPc liberada in vitro de NC EA e NE EA foi de 13% e 15%, respectivamente, ap?s 156 horas. A hem?lise induzida por nanoestruturas cati?nicas apresentou-se aumentada em rela??o ?s nanoestruturas ani?nicas. Ambas foram tamb?m caracterizadas quanto a penetra??o in vivo de AlClPc atrav?s da mucosa da l?ngua e bolsa de hamster, sendo as mucosas analisadas por microscopia confocal. Entretanto, a NE cati?nica preparada com dodecilamina apresentou menor penetra??o na mucosa quando comparado ?s demais formula??es. Estudos de permea??o e reten??o in vitro foram realizados utilizando-se mucosa da bolsa jugal de hamster com leucoplasia induzida por 7, 12- dimetilbenzoantraceno (DMBA). Os estudos de permea??o e reten??o in vitro demonstraram que o AlClPc incorporado ? NE e mesmo em solu??o consegue penetrar at? as camadas vi?veis da mucosa com leucoplasia induzida, permanecendo retido mesmo ap?s 6 horas de sua aplica??o. Os resultados obtidos sugerem, portanto, que as nanopart?culas contendo AlClPc s?o um sistema de vetoriza??o promissor para aplica??es cl?nicas na TFD em altera??es potencialmente malignas, como a leucoplasia oral.In this work, the fotossensitizer chloroaluminum phthalocyanine (AlClPc) was incorporated in different colloidal systems: conventional nanocapsules of, poly(D,Llactide) (PLA), sterically stabilized or peguilated NC (monometoxipolyethylene glycol co- poly(D,L-lactide)) (PLA-PEG) and anionic and cationic nanoemulsions (NE), using the method of precipitation followed by solvent evaporation. PLA and PLA-PEG NC containing AlClPc were developed and characterized for the intravenous treatment of solid tumors in animal model by photodynamic therapy. The nanocapsules were produced by interfacial polymer deposition. The NC preparations containing AlClPc showed narrow distribution of size (monodisperse) with a mean polydispersive index of 0.13. The mean diameter ranged around of 200 nm, according to the formulation and determined by photon correlation spectroscopy. All formulations presented negative potential zeta. The encapsulation percentage of AlClPc was of 100% for all formulations. The release profile was investigated for all preparations and sustained release was observed for 168 hours. The hemolysis induced by free AlClPc or in PLA NC was extremely low (