Isolation of alkalophilic microorganims producers of the enzyme cyclodextrin glycosyltransferase (CGTase).

Uma cultura de bact?ria alcalof?lica, bastonete Gram+, com alta capacidade de produ??o da enzima ciclodextrina glicosiltransferase (CGTase) foi isolada de amostras de solo da cidade Ouro Preto, Minas Gerais (Brasil). A produ??o m?xima da enzima ocorreu a 37?C ap?s 72 horas de incuba??o, sob agita??o de 120 ciclos por minuto, em meio alcalof?lico (pH 10,3) contendo 2% de amido sol?vel, 0,5% de peptona, 0,5% de extrato de levedura, 0,1% de K2HPO4, 0,02% de MgSO4.7H2O e 1% de Na2CO3. A temperatura ?tima de atividade hidrol?tica da enzima situou-se entre 55 e 60?C. Na aus?ncia de substrato, a CGTase mostrou-se 100% est?vel at? 60?C por 30 min. A adi??o de 10 mmol/L de cloreto de c?lcio aumentou sua termo-resist?ncia, resultando em maior produ??o de ciclodextrinas. O pH ?timo em tamp?o borato 50 mmol/L foi 8,0. A atividade e a estabilidade em altas temperaturas indicam potencialidade industrial para essa CGTase. Assim, estudos complementares devem ser realizados para identificar a esp?cie microbiana, purificar a enzima, avaliar o efeito de inibidores enzim?ticos, determinar o tipo de ciclodextrina produzida em maior propor??o e a taxa de convers?o do amido em ciclodextrinas.A culture of an alkalophilic bacterium, rod shaped Gram positive, with high production capacity of the enzyme CGTase was isolated from soil samples of the city of Ouro Preto, Minas Gerais state (Brazil). Maximum enzyme production occurred at 37? C after 72 h of incubation, under agitation of 120 cycles per minute, in alkalophilic medium (pH 10.3) containing 2% soluble starch, 0.5 % peptone, 0.1 % K2HPO4, 0.02 % MgSO4.7H2O and 1% Na2CO3. The optimum temperature of the enzyme hydrolytic activity was between 55 and 60? C. In the absence of substrate, the CGTase showed stability of 100% until 60? C per 30 min. The addition of 10 mmol/L of calcium chloride enhanced its thermal resistance, resulting in a higher production of cyclodextrins. The optimum pH in borate buffer 50 mmol/L was 8.0. The activity and the stability in high temperatures indicate industrial potential for this CGTase. Like this, complementary studies must be realized to identify the microbial species, to purify the enzyme, to evaluate the effect of enzymatic inhibitors, to determine the type of cyclodextrins produced in greater proportion and the conversion rate of starch in cyclodextrins