Modulação Dos Fatores Epigenéticos Nos Momentos Iniciais Da Infecção Pelo Hiv-1 Em Células T Cd4+ In Vitro

Current research trends in human immunodeficiency virus 1/acquired immune deficiency syndrome (HIV-1/AIDS) and epigenetic phenomena have been focusing on elucidating the effect of epigenetics on the viral genome and the subsequent effects on the viral life cycle, particularly during latency. However, the relationship between HIV-1 and possible epigenetic modifications of the host cell genome has not been thoroughly studied. In this context, the objective of the present study was to identify epigenetic factors that are regulated at the beginning of HIV-1 infection in activated and quiescent CD4+ T cells. We analyzed the gene and protein expression of a specific set of epigenetic targets, global DNA methylation, and HIV-1 replication kinetics for 36 hours after infecting CD4+ T cells in vitro. The cells were obtained from the blood bags of eight healthy donors. Among the 84 epigenetic targets analyzed, infection affected the expression of the genes aurora kinase B (AURKB), aurora kinase C (AURKC), and DNA methyltransferase 3B (DNMT3B). The global DNA methylation percentage exhibited opposing trends in the infected and uninfected (control) groups, increasing with time in the former and decreasing in the latter. Moreover, the detected levels of HIV-1 were higher in activated than in quiescent cells. Thus, the epigenetic targets AURKB, AURKC, and DNMT3B and the global DNA methylation profile are regulated during HIV-1 replication in CD4+ T cells, and this regulation can be influenced by the activation state of the cell at the time of infection.As tendências atuais da pesquisa sobre HIV-1/aids e fenômenos epigenéticos têm se concentrado em elucidar o efeito desses fenômenos sobre o genoma viral, e como isso repercute sobre o ciclo de vida do vírus, particularmente na latência. Contudo, pouco tem sido abordado a respeito das relações entre a infecção pelo HIV-1 e as possíveis modificações epigenéticas sobre o genoma da célula hospedeira. Nesse contexto, o objetivo do presente estudo é investigar quais fatores epigenéticos são modulados no início da infecção pelo HIV-1 em linfócitos T CD4+ ativados e não ativados. Para isso, foram analisadas a expressão gênica e proteica de um conjunto específico de alvos epigenéticos, a metilação global do DNA e a cinética de replicação do HIV-1 durante 36 horas após a infecção de linfócitos T CD4+ in vitro. As células foram obtidas a partir de bolsas de sangue de oito doadores saudáveis. Entre os 84 alvos epigenéticos analisados, houve modulação na expressão dos genes aurora quinase B (AURKB), aurora quinase C (AURKC) e DNA metiltransferase 3B (DNMT3B). O percentual de metilação global do DNA das células infectadas aumentou ao longo do tempo, perfil este oposto ao observado para os grupos controles não infectados. Além disso, a detecção do HIV-1 em células ativadas foi maior do que em células não ativadas. Assim, os alvos epigenéticos AURKB, AURKC e DNMT3B e o perfil de metilação global do DNA sofrem modulações durante a replicação do HIV-1 em linfócitos T CD4+, sendo que essa modulação pode ser influenciada pelo estado de ativação celular no momento da infecção.Dados abertos - Sucupira - Teses e dissertações (2017