Influência do gene ADRA2A na etiologia do transtorno de déficit de atenção e hiperatividade (TDAH)

O Transtorno de Déficit de Atenção e Hiperatividade (TDAH) é um dos transtornos psiquiátricos mais comuns da infância e adolescência. É uma doença complexa, com herdabilidade estimada de 76%. Há fortes evidências implicando o sistema noradrenérgico na origem do TDAH. Considerando que o 2A é o receptor adrenérgico mais prevalente do córtex pré-frontal, região implicada no transtorno, o gene que codifica este receptor (ADRA2A) parece ser bastante interessante para estudos moleculares. Trabalhos anteriores do nosso grupo investigaram o polimorfismo MspI (rs1800544) deste gene e verificaram associação do genótipo GG principalmente com os sintomas de desatenção. Além disso, o grupo verificou um efeito do alelo G na melhora dos sintomas de desatenção após tratamento com metilfenidato (MPH). O objetivo do presente trabalho foi compreender melhor a influência do gene ADRA2A na etiologia do TDAH em nossa população, analisando além do MspI os polimorfismos HhaI (rs1800545) e DraI (rs553668), em um estudo de associação e de farmacogenética. A amostra total é composta por 478 crianças e adolescentes com TDAH e seus pais biológicos, provenientes tanto do Programa do Déficit de Atenção e Hiperatividade (ProDAH), vinculado ao Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA), como de escolas públicas de Porto Alegre, e por 100 controles, também obtidos das escolas. Os SNPs foram genotipados por PCR-RFLP (MspI) e PCR TaqMan (HhaI e DraI). As análises de associação foram feitas através de três abordagens: caso-controle populacional (Regressão Logística Condicional), método baseado em famílias (software FBAT aplicado para cada locus individualmente e em haplótipos) e análises dimensionais (ANCOVA). Foi calculado o desequilíbrio de ligação (DL) entre os SNPs e estimativas de haplótipos (programa MLocus). As análises de farmacogenética foram realizadas através do mixed-effect model (MEM). As freqüências genotípicas estão em equilíbrio de HardyWeinberg, concordando com o descrito na literatura para o mesmo grupo étnico, assim como as freqüências gênicas. Uma associação do SNP MspI com sintomas de desatenção foi detectada através da análise dimensional, em que a presença do alelo G contribuiu para o aumento nos escores desses sintomas (p=0,027). As análises mostraram também uma tendência de associação com o polimorfismo DraI em alguns grupos de pacientes, definidos por diferentes características clínicas, através do FBAT (individualmente e em haplótipos) e das análises dimensionais (0,049<p<0,098), em que o alelo T estaria contribuindo para a etiologia da doença. Ainda, o estudo de farmacogenética detectou um efeito do alelo A gerado pelo SNP HhaI na melhora dos sintomas de desatenção após o tratamento com MPH, especificamente na amostra comunitária (p=0,036). É possível sugerir, então, que o gene ADRA2A atue efetivamente na etiologia do TDAH na nossa população, principalmente através de um efeito modificador do polimorfismo MspI sobre sintomas de desatenção. O provável efeito do SNP DraI em diferentes grupos de sintomas deve ser investigado em maior detalhe. Porém, se verdadeiro, possivelmente seja um efeito na suscetibilidade ao TDAH de modo geral, atuando principalmente de forma independente do MspI apesar do elevado DL. Acreditamos que o resultado positivo obtido para o HhaI também se deva ao alto DL com o MspI, refletindo o efeito deste na resposta ao tratamento com MPH, observado previamente na mesma amostra. Análises adicionais como, por exemplo, estudos funcionais e interações gene-gene serão essenciais para aprimorar ainda mais a compreensão acerca da influência do gene ADRA2A na etiologia do TDAH, em geral e na nossa população.Attention-Deficit/Hyperactivity Disorder (ADHD) is one of the most common psychiatric disorders of childhood and adolescence. It is considered a complex disease, with an estimated heritability of 76%. There are strong evidences implicating the noradrenergic system in the origin of ADHD. Considering that 2A is the most prevalent noradrenergic receptor in prefrontal cortex, region involved in the disease, the gene that codifies this receptor (ADRA2A) seems to be interesting for genetic studies. Previous studies from our group investigated the MspI (rs1800544) polymorphism in this gene and found association of GG genotype mainly with inattentive symptoms. Moreover, the group detected an effect of G allele on the improvement of inattentive symptoms under treatment with methylphenidate (MPH). The aim of the present work was to achieve a better understanding on ADRA2A influence in the etiology of ADHD in our population, analyzing besides MspI both HhaI (rs1800545) and DraI (rs553668) polymorphisms, in a study of association and pharmacogenetics. The total sample consists of 478 children and adolescents with ADHD and their biological parents, obtained from AttentionDeficit/Hyperactivity Disorder Outpatient Program (ProDAH) of Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA) and from public schools of Porto Alegre, and 100 controls, also obtained in schools. The SNPs were genotyped by PCR-RFLP (MspI) and PCR-TaqMan (HhaI e DraI). Association analyses were performed using three approaches: populational case-control (Conditional Logistic Regression), family-based method (FBAT software applied to individual locus and haplotypes) and dimensional analyses (ANCOVA). Linkage disequilibrium (LD) among SNPs and haplotypes estimates were calculated (MLocus program). Pharmacogenetic analyses were performed through mixed-effect model (MEM). Genotype frequencies were in Hardy-Weinberg equilibrium, agreeing with those described in the literature for the same ethnic group, as well as allele frequencies. An association between MspI SNP and inattentive symptoms was detected by dimensional analyses, the presence of G allele contributing to the increase of scores in these symptom dimension (p=0.027). Analyses also showed a trend for association with DraI polymorphism in some groups of patients, defined by different clinical characteristics, through FBAT (individually and in haplotypes) and dimensional analyses (0.049<p