O envolvimento de microRNAs no diabetes mellitus tipo 1 e na doença renal do diabetes

Os microRNAs (miRNAs) são pequenas moléculas de RNA que regulam a expressão gênica e, por isso, estão envolvidos em vários processos biológicos e patológicos. Evidências sugerem que os miRNAs possuem um papel tanto no sistema imune quanto na proliferação, metabolismo e morte das células beta pancreáticas, os quais são processos envolvidos na patogênese do diabetes mellitus tipo 1 (DM1). Diversos estudos investigaram se perfis de expressão de miRNAs estão associados ao DM1; no entanto, seus resultados são ainda inconclusivos. Sendo assim, realizou-se uma revisão sistemática e um estudo caso-controle, seguidos de análises de bioinformática, com o objetivo de se identificar um perfil de expressão de miRNAs em pacientes com DM1. A revisão sistemática incluiu 33 estudos que investigaram a expressão de miRNAs em indivíduos com e sem DM1 e em modelos animais dessa doença. Em geral, 11 miRNAs circulantes no sangue estavam consistentemente desregulados em pacientes com DM1 comparado aos indivíduos controles. Desses 11 miRNAs, miR- 146a-5p, miR-150-5p, miR-342-3p e miR-1275 estavam menos expressos em pacientes com DM1 comparado aos controles; enquanto miR-21-5p, miR-24-3p, miR-100-5p, miR-148a-3p, miR-181a-5p, miR-210-3p e miR-375 estavam mais expressos em pacientes com DM1. Além disso, análises in silico demonstraram que esses 11 miRNAs estão envolvidos em vias relacionadas a funções do sistema imune, apoptoso e biossíntese de insulina, sugerindo que esses miRNAs podem ter um papel importante na patogênese do DM1. No estudo caso-controle, a expressão de 48 miRNAs foi analisada no plasma de 33 pacientes com DM1 (casos) e de 26 indivíduos não-diabéticos (controles), utilizando-se a técnica de macroarray. Em seguida, cinco miRNAs diferencialmente expressos entre casos e controles foram selecionados para a análise de validação dos resultados de expressão, em uma amostra independente (27 casos e 14 controles), utilizando-se RT-qPCR. Como resultado da análise de macroarray, nove miRNAs foram diferencialmente expressos em pacientes com diagnóstico recente de DM1 (10 anos de DM1 (controles DM1), 35 pacientes com diferentes graus de DRD (casos) e 10 indivíduos saudáveis, através de análise de macroarray. Posteriormente, cinco miRNAs desregulados nos casos foram escolhidos para validação em uma amostra independente (10 controles com DM1, 19 casos e 10 indivíduos saudáveis), utilizando-se RT-qPCR. Como resultado do macroarray, nove miRNAs foram diferencialmente expressos em pacientes com DRD comparados aos controles DM1. A expressão aumentada dos miR-21-3p e miR-378a-5p e a expressão diminuída dos miR-16-5p e miR-29a-3p nos pacientes com DRD comparado aos controles DM1 foi confirmada na amostra de validação. Não foi confirmada a associação do miR-503- 5p com DM1. A análise in silico demonstrou que os cinco miRNAs selecionados para a validação regulam genes das vias PI3K/Akt, longevidade, TGF-β1 e relaxina, o que indica que esses miRNAs podem ter um papel importante na patogênese da DRD.MicroRNAs (miRNAs) are small RNA molecules that regulate gene expression; consequently they are involved in several biological and pathological processes. Growing evidence suggests that miRNAs play a key role in immune system functions as well as in pancreatic beta-cell metabolism, proliferation and death, which are processes involved in type 1 diabetes mellitus (T1DM) pathogenesis. Several studies have investigated if miRNA expression profiles are associated with T1DM; however, their results are still inconclusive. Thus, we performed a systematic review and a case-control study, both followed by bioinformatic analysis, aiming to identify a miRNA expression profile associated with T1DM. The systematic review included 33 studies that analyzed miRNA expressions in T1DM patients (cases) and nondiabetic subjects (controls) or in murine models of this disease. In general, 11 circulating miRNAs were consistently dysregulated in cases compared to controls. Among these 11 miRNAs, miR-146a-5p, miR-150-5p, miR-342- 3p e miR-1275 were downregulated in T1DM patients compared to controls; while, miR-21-5p, miR-24-3p, miR-100-5p, miR-148a-3p, miR-181a-5p, miR-210-3p e miR- 375 were upregulated in T1DM patients. Moreover, in silico analysis showed that these 11 miRNAs are involved in pathways related to the imune system, apoptosis and insulin biosynthesis, suggesting that these miRNAs could be involved in T1DM pathogenesis. In the case-control study, expressions of 48 miRNAs were analyzed in plasma of 33 T1DM patients (cases) and 26 age- and gender-matched nondiabetic subjects (controls), using a macroarray technique. After that, five differently expressed miRNAs between cases and controls were selected for validation of their results in an independente sample (27 cases and 14 controls), using RT-qPCR. As result of the macroarray analysis, nine miRNAs were diferently expressed in plasma of recentlydiagnosed T1DM patients ( 10 years of T1DM diagnosis (T1DM controls), 35 patients with diferent stages of DKD and 10 healthy subjects using macroarray analysis. Five dysregulated miRNAs in T1DM cases were then selected for validation in an independent sample (10 T1DM controls, 19 DKD cases, and 10 healthy subjects), using RT-qPCR. As result, nine miRNAs were differentially expressed between DKD cases and T1DM controls. After validation, miR-21-3p and miR-378-3p were confirmed as being upregulated, while miR-16-5p and miR-29a-3p were confirmed as being downregulated in DKD cases compared to T1DM controls. The association between miR-503-5p expression and T1DM was not confirmed. The in silico analysis indicated that the five miRNAs choosen for validation regulate genes from PI3K/Akt, longevity, TGF-β1, and relaxin signaling pathways, reinforcing that these miRNAs have a role in DKD pathogenesis