Low molecular weigth proteins of bovine seminal plasma related with semen freezability using two-dimensional polyacrilamide gel electrophoresis

A eletroforese bidimensional em géis de poliacrilamida representa uma técnica valiosa para separação e caracterização das proteínas e através deste método muitas proteínas do plasma seminal de várias espécies foram descritas e caracterizadas. O objetivo do presente estudo foi relacionar o perfil das proteínas de baixo peso molecular do plasma seminal bovino com a congelabilidade do sêmen. O plasma seminal de 16 reprodutores bovinos de maior e menor congelabilidade foram utilizados neste estudo. Foram encontradas 12 bandas protéicas nas amostras de plasma seminal analisadas nos géis SDS-PAGE a 15%. Apenas 6 das 12 bandas foram detectadas em todos os ejaculados estudados, sendo que somente as bandas protéicas 3 (15-16kDa; pI 4,7-5,2), 5 (16-17kDa; pI 4,1-4,8) e 7 (10-12kDa; pI 4,8-4,9) não apresentaram variação significativa entre as amostras de plasma seminal dos reprodutores. Das proteínas analisadas neste estudo, 4 apresentaram-se quantitativamente superiores (P<0,05) nas amostras dos reprodutores pertencentes ao grupo de maior congelabilidade, as bandas 3 (15-16kDa; pI 4,7-5,2), 7 (11-12kDa; pI 4,1-4,8), 11 (13-14kDa; pI 6,90-6,50) e 23 (18-20kDa; pI 4,8-5,2), enquanto que a banda protéica 25 (25-26kDa; pI 6,0-6,5) mostrou-se significativamente superior (P<0,05) nos reprodutores de menor congelabilidade do sêmen. As evidências encontradas neste experimento mostram que existem diferenças no perfil protéico dos reprodutores com maior e menor congelabilidade do sêmen, sugerindo as proteínas 3, 7, 11, 23 como possíveis marcadores da congelabilidade do sêmen e a proteína 25 como indicativo da menor congelabilidade do sêmen.Two-dimensional gel polyacrylamide electrophoresis represents a valuable tool for the separation and characterization of proteins from complex biological samples. Many proteins from seminal plasma of various animal have been described and characterized and 2-D PAGE has been widely used for their separation and analysis. The objectives of this study were to evaluate the low weight protein profile of bovine seminal plasma using two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (2D-PAGE) and to find if any of these proteins was correlated with semen freezability. A total of 16 bull seminal plasma were used in this study. Of the 12 proteins found in the research bulls, three spots, present in all samples, 3 (15-16kDa), 5 (16-17kDa) and 7 (10-12kDa) had not a statistically significant variation among bulls, regardless the freezability group. Four proteins showed superior relative content (P<0.05) in seminal plasma samples collected from bulls with high semen freezability, than in the samples of the bulls of low semen freezability: the spots 3 (15-16kDa, pI 4.7-5.2), 7 (11-12kDa, pI 4.8-4.9), 11 (13-14kDa, pI 6.0-6.5) and 23 (20-22kDa, pI 4.8-5.2). On the other hand, the spot 25 (25-26kDa, pI 6.0-6.5) showed superior relative protein content (P