Influencia de las condiciones aerobias y microaerófilas en la cinética de crecimiento de Saccharomyces cerevisiae, y en la diferenciación de las subpoblaciones quiescentes y no quiescentes

La gran mayoría de las células, desde procariotas hasta organismos vertebrados, pasan la mayor parte de su vida en quiescencia, un estado definido por la ausencia temporal y reversible de la proliferación. La levadura Saccharomyces cerevisiae, representa un modelo ideal para el estudio de la quiescencia, ya que es el organismo eucariota más conocido y manejable en todos los niveles del análisis experimental. Además, se ha demostrado que las levaduras y células de mamífero comparten muchas características cuando están en estado quiescente. En la actualidad, el conocimiento que existe sobre la quiescencia, es limitado, los mecanismos de entrada, mantenimiento y salida de este estado son aun desconocidos; esto debido en parte a la dificultad de separar las células quiescentes de las no quiescentes. En el laboratorio, los cultivos de Saccharomyces cerevisiae en estado estacionario presentan una población heterogénea, conformada por células quiescentes y no quiescentes. El objetivo de esta investigación es evaluar la influencia de las condiciones de crecimiento aerobias y microaerófilas en la cinética de crecimiento y en la diferenciación en población quiescente y no quiescente. Primero se hicieron ensayos para medir la cinética de crecimiento de la población total en fase estacionaria tanto para crecimiento en condiciones aerobias como microaerófilas; luego se hizo la separación por centrifugación en gradiente de densidad de las subpoblaciones quiescentes y no quiescentes; y se determinó la cinética de estas poblaciones por separado. La concentración de oxígeno inicial condiciona la cinética de crecimiento, sobre todo la duración de la fase lag. En condiciones microaerófilas, el tiempo requerido en fase lag es prácticamente el doble que en condiciones aerobias de crecimiento. Los resultados cinéticos de esta investigación permitieron confirmar resultados de estudios previos sobre la población en fase estacionaria de Saccharomyces cerevisiae, basados en citometría de flujo. En condiciones aerobias, se identificó la existencia de dos poblaciones distintas en la fase estacionaria (quiescente y no quiescente), mientras que en condiciones microaerófilas los resultados indican que no se lleva a cabo esta diferenciación