Identifikasi Single Nucleotide Polymorphisms (SNP) C-53 1 2T Enhancer Gen Renin pada Pasien Hipertensi di Rumah Sakit Dr. Saiful Anwar Malang

Hipertensi, keadaan tekanan darah sistole lebih dari 140 mmHg dan tekanan diastole lebih dari 90 mmHg, merupakan salah satu masa !all kesehatan utama yang terjadi di Indonesia. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui varian basa nukleotida yang terdapat pada SNP C-5312T enhancer renin pada pasien hipertensi di Rumah Sakit Dr. Saiful Anwar Malang. Pengambilan DNA dari sel darah putih pasien hipertensi menggunakan kit Purelink Genornic DNA Kits — Invitrogen. Selanjutnya DNA yang sudah diekstraksi dilakukan PCR (Polymerase Chain Reaction). Primer yang digunakan adalah primer forward 5 - GT AGTGCCATTTTT AGGAAC-3 dan primer reverse yaitu 5- AACACCAAAGCAGGCTTAA-3. Pengaturan siklus pada PCR sebagai berikut 95°C selama 3 menit, denaturasi 95°C selama 15 detik, annealing 64°C selama 20 detik, extension 72°C selama 1 menit, dan post-ekstensi 72°C selama 10 menit, untuk 35 siklus. Produk PCR diuji secara kualitatif pada gel agarosa 1,5%. Produk PCR selanjutnya dilakukan sequencing. Produk PCR sebanyak 20 ill beserta primer forward 10 pmol sebanyak 10 µl dikirim ke 1st BASE, Malaysia untuk dilakukan sequencing. Hasil sequencing dikirim melalui sure! dan dibuka menggunakan program Sequence Scanner v1.0. Hasil PCR yang diperoleh rnenunjukkan bahwa kode subjek pasien A_S22 memiliki panjang pasangan basa sebesar 254 bp. Hasil DNA sequencing menunjukkan bahwa hampir keseluruhan sequence memiliki tingkat kemumian yang tinggi, serta hasil dari BLAST melalui NCBI jugs rnenunjukkan bahwa sequence ini merupakan bagian dari enhancer gen renin. Hasil dan DNA sequence dan kode subjek A_S22 ini mempunyai varian C pada SNP C-5312