Pengaruh Antosianin Terhadap Ketebalan Epitel, Indeks Apoptosis Dan Ekspresi P53 Sel Epitel Vagina Pada Tikus Putih (Rattus Norvegicus) Ovariektomi

Menopause merupakan fenomena fisiologis pada wanita yang terkait denganberhentinya fungsi ovarium dan juga siklus menstruasi. Disfungsi ovariummenyebabkan penurunan kadar estrogen. Konsekuensi dari turunnya kadar estrogenyang dihasilkan akan menimbulkan efek fenotipik pada regenerasi dan perbaikan jaringanserta munculnya berbagai tanda-tanda dan gejala. Salah satu organ yang mengalamidampak akibat terjadinya hipoestrogen adalah vagina. Pada vagina terjadi atrofi danpenipisan epitel. Estrogen menginduksi proliferasi sel epitel dan diferensiasi, sedangkanhasil deplesi estrogen adalah atrofi disertai dengan apoptosis. Apoptosis terjadi sebagaimekanisme pertahanan pada ketika terjadi kerusakan sel. Apoptosis dapat diaktifkan olehp53 yang berperan sebagai regulator siklus sel, yang memegang peranan penting dalamadanya respon stres selular.Pada saat menopause penurunan kadar estrogen merupakan faktor yangmempengaruhi meningkatnya stres oksidatif. Stres oksidatif merupakan kondisi kerusakanoksidatif yang terjadi ketika adanya ketidakseimbangan antara radikal bebas danpertahanan antioksidan. Antosianin merupakan salah satu bioaktif dalam menangkalradikal bebas dan paling dikenal sebagai antioksidan. Konsumsi makanan kayaantioksidan bisa menjadi strategi yang efektif untuk mengurangi stres oksidatif dan gejaladan komplikasi yang terkait dengan wanita yang mengalami menopause.Penelitian ini menggunakan desain True Experimental dengan pendekatanposttest only group control design. Penelitian ini menggunakan hewan coba yaitu tikusputih (Rattus norvergicus) betina. Penelitian ini dilakukan untuk membuktikan pengaruhantosianin terhadap ketebalan epitel vagina, indeks apoptosis, dan ekspresi p53 pada selepitel vagina, mengetahui korelasi antara ketebalan epitel vagina dengan indeks apoptosisserta mengetahui korelasi antara ketebalan epitel vagina dengan ekspresi p53 pada tikusovariektomi. Penelitian dibagi menjadi 4 kelompok, yaitu : 1) kelompok kontrol (K) yangdilakukan ovariektomi tetapi tidak diberikan antosianin; 2) Kelompok perlakuan 1 (P1) yangdilakukan ovariektomi dan diberikan antosianin dengan dosis 20 mg/KgBB/hr; 3) Kelompokperlakuan 2 (P2) yang dilakukan ovariektomi dan diberikan antosianin dengan dosis 40mg/KgBB/hr; dan 4) Kelompok perlakuan 3 (P3) yang dilakukan ovariektomi dan diberikanantosianin dengan dosis 80 mg/KgBB/hr.Pada saat memulai penelitian hewan coba diaklimatisasi terlebih dahulu,kemudian hewan coba diovariektomi untuk memperoleh kondisi hipoestrogen. Kondisihipoestrogen terjadi setelah 28 hari post ovariektomi. Hewan coba yang telah dalamkondisi hipoestrogen diberikan antosianin dengan dosis 20 mg/KgBB/hari, 40mg/KgBB/hari, dan 80 mg/KgBB/hari selama 30 hari, kemudian hewan coba diterminasidan dilakukan pengambilan organ vagina.Kemudian dilakukan pemeriksaan untuk mengetahui ketebalan epitel vagina yangdiamati menggunakan mikroskop cahaya dan diukur menggunakan software image raster.Indeks apoptosis pada sel epitel vagina menggunakan Tunel assay dan ekspresi p53menggunakan metode imunohistokimia. Kemudian dilakukan analisis statistik ujikomparasi untuk mengetahui pengaruh pemberian antosianin terhadap ketebalan epitelvagina, indeks apoptosis dan ekspresi p53, serta menggunakan uji korelasi untukmengetahui korelasi antara ketebalan epitel vagina dengan indeks apoptosis, dan antaraketebalan epitel dengan ekspresi p53 pada sel epitel vagina tikus putih (Rattus novergicus)ovariektomi.Hasil penelitian pengaruh antosianin terhadap ketebalan epitel vagina, indeksapoptosis dan ekspresi p53 menggunakan uji One Way Anova yang kemudian dilanjutkandengan uji LSD hasilnya terdapat perbedaan yang bermakna rerata ketebalan epitelvagina, indeks apoptosis dan ekspresi p53 pada kelompok kontrol dan perlakuan. Hasilanalisis korelasi ketebalan epitel dengan indeks apoptosis menggunakan uji korelasiixPearson menunjukkan bahwa p-value = 0,000 < α=0,05, sehingga dapat diartikan bahwaH0 ditolak dan dinyatakan ada hubungan yang signifikan antara ketebalan epitel denganindeks apoptosis pada sel epitel vagina tikus putih (Rattus novergicus) ovariektomi dengankoefisien korelasi sebesar (-0,703). Sedangkan hasil analisis korelasi ketebalan epitelvagina dan ekspresi p53 menunjukkan bahwa p-value = 0,000 < α=0,05, dapat diartikanbahwa H0 ditolak dan dinyatakan ada hubungan yang signifikan antara ketebalan epitelvagina dengan ekspresi p53 pada sel epitel vagina tikus putih (Rattus novergicus)ovariektomi dengan koefisien korelasi sebesar (-0,845).Vagina merupakan organ yang sensitif akibat penurunan kadar estrogen padawanita postmenopause. Hilangnya produksi estrogen ovarium berhubungan denganpenipisan epitel vagina. Pemberian antosianin berpengaruh secara signifikan dalammeningkatkan ketebalan epitel vagina pada berbagai kelompok. Antosianidins memilikipotensi untuk berikatan dengan reseptor estrogen α. Antosianidin menunjukkanaktivitas estrogenik yang signifikan. Stres oksidatif mengalami peningkatan pada organvagina tikus ovariektomi. Antosianin yang merupakan antioksidan, berfungsi melindungisel dari apoptosis yang diinduksi oleh stres oksidatif. Antosianin meningkatkan ekspresiBcl-2 (protein anti apoptosis), di sisi lain antosianin dapat menurunkan ekspresi Bad danBax, anggota keluarga protein BCL-2 yang pro-apoptosis dan juga mengurangi ataumenekan ekspresi p53, dan caspase-3, yaitu protease yang terkait dengan aktivasikematian sel. Antosianin menekan apoptosis pada jalur ekstrinsik yang diinduksi oleh stresoksidatif.Kesimpulan dari penelitian ini bahwa antosianin dapat meningkatkan ketebalanepitel vagina pada tikus putih (Rattus novergicus) ovariektomi. Antosianin dapatmenurunkan ekspresi p53 dan indeks apoptosis sel epitel vagina pada tikus ovariektomi.Terdapat korelasi dengan arah negatif dan kekuatan korelasi kuat antara ketebalan epitelvagina dan indeks apoptosis sel epitel vagina pada tikus putih (Rattus norvegicus)ovariektomi serta terdapat korelasi dengan arah negatif dengan kekuatan korelasi kuatantara ketebalan epitel vagina dan ekspresi p53 sel epitel vagina pada tikus putih (Rattusnorvegicus) ovariektomi