Validación de las técnicas serológicas incluidas en los algoritmos de diagnóstico y confirmación de la infección por Trypanosoma cruzi

Tesis (Tecnólogo Médico con especialidad en Bioanálisis Clínico, Inmunohematología y Banco de Sangre)La enfermedad de Chagas es una infección causada por el protozoo flagelado trypanosoma cruzi. Esta parasitosis se presenta en tres etapas bien definidas (aguda, crónica indeterminada y crónica determinada). El diagnóstico serológico juega un rol muy importante en las fases crónica e indeterminada y se basa en la pesquisa de anticuerpos circulantes anti-trypanosoma. (Atías, 1999; Botero, 1992; MINSAL Guía, 2011). El objetivo de esta Unidad de Investigación fue aplicar protocolos internacionales de validación de métodos cualitativos (EP5-A2 y EP12-A2) a las técnicas de ELISA, lnmunofluorescencia Indirecta y Western blot desarrolladas en el Instituto de Salud Pública de Chile utilizadas en el diagnóstico y confirmación de la enfermedad de Chagas. El protocolo EP5-A2 fue aplicable solo a la técnica de ELISA, ya que es la única que puede arrojar resultados cuantificables para precisión. Para estudios de sensibilidad y especificidad se utilizó un panel de 171 muestras provenientes del Control de Calidad Externo recibido por el Laboratorio de Referencia organizado por OPS (Organización Panamericana de la Salud) de las cuales 26 eran positivas y 145 negativas. Para el estudio de precisión se utilizaron muestras controles positivos débiles y fuertes además de muestras negativas. Al comparar los resultados obtenidos para el protocolo EP12-A2 con los requisitos de calidad previamente establecidos se pudo observar que las tres técnicas cumplieron con los valores de sensibilidad y especificidad mayores al 95% esperado. Otros parámetros calculados como índice kappa, Chi-cuadrado más la utilización de curvas ROC y Razón de Verosimilitud apoyan el poder diagnóstico de las técnicas. Según el protocolo EP5-A2 para el estudio de precisión en condiciones de repetibilidad y de precisión intermedia los coeficientes de variación obtenidos se encuentran todos con valores inferiores al 20% esperado. De acuerdo a los resultados obtenidos se puede concluir que las tres técnicas presentan parámetros de sensibilidad, especificidad y concordancia dentro de los requisitos internacionalmente aceptados para técnicas de estas características los que aumenta la sensación de confiabilidad en la metodología empleada. Además la metodología de ELISA evaluada presenta tanto resultados de precisión intermedia como en condiciones repetibilidad dentro del rango esperado lo que indica un comportamiento estable en el tiempo con una buena dispersión de los datos