Diagnóstico de Strongyloides stercoralis en un hospital de tercer nivel: Retos y mejoras

Tesis doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Ciencias, Departamento de Biología Molecular. Fecha de lectura: 10-10-2019Esta tesis tiene embargado el acceso al texto completo hasta el 10-04-2021La estrongiloidiasis, infección causada por el nematodo intestinal Strongyloides stercoralis, sigue siendo una gran desconocida tanto en áreas endémicas como en nuestro medio, debido a que la mayoría de los casos son asintomáticos y a las propias limitaciones en el diagnóstico de laboratorio. A pesar de tratarse de una enfermedad tropical, el aumento del número de viajeros y de los movimientos poblacionales, asociados a la inmigración y a los refugiados, ha hecho que cada vez sean más comunes los casos importados. El screening y tratamiento de los pacientes con infección por S. stercoralis es indispensable debido a la posibilidad de desarrollar cuadros graves en caso de inmunosupresión. Por ello, el objetivo de este estudio fue conocer la situación de la infección en el Hospital Universitario 12 de Octubre, tanto desde el punto de vista clínicoepidemiológico como desde la perspectiva del laboratorio de Microbiología. De esta forma, se evaluaron las carencias y posibles mejoras en el diagnóstico parasitológico y serológico, así como la introducción de técnicas moleculares en la rutina asistencial. Se detectó un importante número de casos de estrongiloidiasis importada, principalmente en pacientes inmigrantes latinoamericanos. Algo menos de la mitad de los casos tuvo síntomas atribuibles a la estrongiloidiasis, siendo la eosinofilia la principal alteración analítica. La detección de larvas en heces se asoció a la clínica gastrointestinal, a la presencia de comorbilidades y a la eosinofilia. Los factores asociados a la inmunosupresión fueron el género masculino y la ausencia de síntomas y de eosinofilia. Los índex de la serología de S. stercoralis fueron mayores en pacientes con detección de larvas en heces y menores en pacientes inmunosuprimidos. El seguimiento de los casos fue muy heterogéneo, normalizándose los niveles de eosinófilos y los índex serológicos antes de los 6 meses post-diagnóstico en la mayoría de los pacientes tratados. Tras la implantación de la RT-PCR en heces, las recomendaciones sobre la recogida/conservación de las muestras y el cambio en el método de lavado de la técnica serológica, la proporción de casos con detección de larvas en heces aumentó hasta seis veces con respecto al inicio del estudio. La técnica serológica basada en antígeno recombinante no fue lo suficientemente sensible como para sustituir a la realizada de rutina, basada en antígeno crudo. En cuanto al cultivo en placa de agar, su rendimiento fue tres veces mayor que el de la visualización directa de las heces tras la concentración con el método formalina-éter, aunque el tiempo de incubación del cultivo no debería reducirse a menos de una semana. En conclusión, se describe una importante cohorte de pacientes con infección por S. stercoralis, así como una mejora en el diagnóstico de laboratorio. Es necesaria la aplicación de protocolos tanto de screening del inmigrante asintomático como de seguimiento de los casos de estrongiloidiasis.Strongyloidiasis, caused by the intestinal nematode Strongyloides stercoralis, remains an underdiagnosed infection both in endemic and in non-endemic countries because most of the cases are asymptomatic and due to the limitations in laboratory diagnosis. Although it is a tropical disease, imported cases have become more and more common, due to the increasing number of travellers, as well as population movements associated with immigration and refugees. The screening and treatment of patients with S. stercoralis infection is essential because of the potential of developing severe symptoms in immunosuppressed patients. Therefore, the aim of this study was to know the situation of the infection in the Hospital Universitario 12 de Octubre, both from the clinical-epidemiological point of view and from the perspective of the Microbiology laboratory. In this way, the limitations and possible improvements in parasitological and serological diagnosis were evaluated, as well as the introduction of molecular techniques in the routine laboratory testing A significant number of cases of imported strongyloidiasis were detected, mainly in immigrant Latin American patients. Less than half of the patients had symptoms related to S. stercoralis, being the eosinophilia the main analytical alteration. The detection of larvae in faeces was associated to gastrointestinal symptoms, comorbidities and eosinophilia. Immunosuppression was associated with being male, the absence of symptoms and the absence of eosinophilia. Serological indexes were higher in those with larvae detection in stool and lower in immunosuppressed patients. Patient follow-up was very heterogeneous. In most of the treated patients, eosinophil levels and serological indexes decreased within the 6 months post-diagnosis. After the implementation of the faecal RT-PCR, as well as the recommendations regarding the collection and conservation of stool samples and the change in the washing method of the serological technique, the proportion of cases with detection of larvae in stool increased up to six times compared to the beginning of the study. The serological technique based on recombinant antigen was not sensitive enough to replace the one based on crude antigen; which is the routine technique used in our laboratory. The detection rate of agar-plate culture was three times higher than the detection rate of direct visualization of the stool after formalin-ether concentration, although the incubation of the agar-plate culture should not be less than one week. In conclusion, in this study, an important cohort of patients with S. stercoralis infection is described, as well as an improvement in the laboratory diagnosis. There is an urgent need to apply screening protocols in asymptomatic immigrants and monitoring cases of strongyloidiasis