Efeitos da troca diária de diluente sobre a viabilidade da célula espermática ovina refrigerada a 5°C

Orientador: Prof. Dr. Romildo Romualdo WeissDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrarias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa : Curitiba, 19/03/2019Inclui referênciasResumo: O objetivo desse trabalho foi avaliar os efeitos da troca diária do diluente no sêmen refrigerado ovino, avaliando sua ação na viabilidade dos espermatozoides. Para o estudo, formou-se um pool de sêmen com três ejaculados, de três carneiros da raça Dorper, após a avaliação subjetivas dos parâmetros espermáticos. O pool de sêmen foi diluído no meio Glicina-Gema-Leite (GGL), na proporção 1:4, para posterior fracionamento nos grupos controle (controle GGL), grupo TGG (teste GGL) e grupo TDD (pós-ressuspensão). Após a diluição, submeteu-se as amostras ao processo de refrigeração a 5°C, em Botutainer®. No intervalo de 24 horas, realizou-se a avaliação de uma alíquota de cada amostra por 5 dias, agrupando-as em 6 momentos (0h), (24h), (48h), (72h), (96h) e (120h). O processo de resssuspensão do pellet de espermatozoides em diluente fresco foi repetido diariamente até o grupo TG atingisse o mínimo de ? 30% de MP, mediante análises subjetivas no microscópio óptico. O grupo controle apresentou menor motilidade e vigor espermático, e seus SPZ obtiveram maior percentual de defeitos morfológicos que os SPZ dos grupos TG e TDD. Também, apresentou maior concentração da enzima AST, que foi correlacionada com o aumento do percentual de lesão de acrossomo nos SPZ, e do menor consumo de frutose durante o processo. A adição do diluente novo cada 24 horas apresentou efeito positivo sobre os SPZ, uma vez que o grupo TG preservou os parâmetros espermáticos por 120 horas. No quinto dia de avaliação, sua MP foi equivalente a 32%, vigor 3,20, 67,30% de SPZ com membrana íntegra e concentração de 184,3 x 106 de SPZ viáveis por mL antes da centrifugação. No grupo TDD, os valores apresentados foram de 37% de MP, vigor 4,40, 66% de SPZ com membrana íntegra e concentração de 175,8 x 106 de SPZ viáveis por mL, e um consumo de frutose 19,00 mg/ml. Este foi maior durante o tempo de avaliação do estudo demostrando um maior aproveitamento desse substrato pelos espermatozoides. Isso demonstrou que a troca diária de diluente foi eficiente para preservar a viabilidade espermática por um maior período de tempo. Palavras chaves: ovinos, refrigeração, diluição, sêmen, durabilidade.Abstract: The objective of this study was to evaluate the effects of daily diluent exchange on refrigerated sheep semen, evaluating its action on sperm viability for the study, a semen pool with three ejaculates of three Dorper rams was formed after the subjective evaluation of sperm parameters. The semen pool was diluted in Glycine-Milk-Yolk (GGL) medium, in a 1: 4 ratios, for subsequent fractionation in the control (GGL control), TGG (GGL test) and TDD (post-resuspension) groups. After dilution, the samples were subjected to refrigeration at 5°C in Botutainer®. Within 24 hours, an aliquot of each sample was evaluated for 5 days, grouping them into 6 moments (0h), (24h), (48h), (72h), (96h) and (120h). The process of resuspension of the sperm pellet in fresh diluent was repeated daily until the TG group reached a minimum of ? 30% of MP, by subjective analysis under the optical microscope. The control group had lower sperm motility and vigor, and their SPZ obtained a higher percentage of morphological defects than the SPZ of TG and TDD groups. Also, it presented higher concentration of AST enzyme, which was correlated with the increase in the percentage of acrosome lesion in the SPZ, and the lower consumption of fructose during the process. The addition of new diluent every 24 hours had a positive effect on SPZ, since TG group preserved sperm parameters for 120 hours. On the fifth day of evaluation, its MP was equivalent to 32%, vigor 3.20, 67.30% SPZ with intact membrane and concentration of 184.3 x 106 viable SPZ per mL before centrifugation. In the TDD group, the values presented were 37% MP, vigor 4.40, 66% intact membrane SPZ and 175.8 x 106 viable SPZ concentration per mL, and a fructose consumption 19.00 mg / ml. This was higher during the study evaluation time showing greater use of this substrate by sperm. This demonstrated that daily diluent exchange was efficient to preserve sperm viability for a longer period. Keywords: sheep, refrigeration, dilution, semen, durabilit