PLOMB ET INFERTILITE MASCULINE: PARAMETRES SPERMATIQUES, MISE EN EVIDENCE DU PHENOMENE D’APOPTOSE ET EVALUATION DE L’EXPRESSION DES GENES PAR RT-PCR CHEZ LE RAT WISTAR

Several experimental studies and observations have suggested that alterations in male reproductive function may be due to toxic factors in our environment. In particular, they have involved molecules of industrial or anthropogenic origin grouped under the generic term of endocrine disrupters. Among the pollutants involved are many xenobiotics such as solvents, pesticides and heavy metals. They are suspected of being responsible for the decline in male and female fertility observed over the past century. Thus in order, to assess the effects of lead on male endocrine and exocrine reproductive functions, young male Wistar pubescent rats received 0.3% lead acetate orally for 90 consecutive days. The control rats were treated under the same conditions but only received distilled water. After the exposure period, the rats were euthanized. Animal blood was collected, testes and epididymis were isolated for sperm, histopathological, biochemical and molecular tests. This chronic exposure induced a significant functional change in sperm parameters, decreased sex hormones and disturbed spermatogenesis stages in rats exposed to lead. In addition, the assessment of the oxidative status of the rats in the study revealed an increase in MDA in the serum and testicular homogenates of exposed rats compared to unexposed rats. At the molecular level, RT-PCR analysis of the activity of antioxidant enzymes (SOD, catalase, glutathione peroxidase) and genes involved in apoptosis (P53, TNFα, Bcl2 Caspase-3) showed a modification in the expression of antioxidant enzymes and a decrease in the activity of genes involved in cell proliferation in exposed rats compared to unexposed rats. The various studies undertaken in this study have highlighted the harmful effects of lead on the male reproductive system. In the light of the reported scientific data, lead is believed to be involved in the imbalance of the oxidative balance leading to a reduction in sperm parameters, a disorganization of testicular structures, a reduction in sperm production and an increase in apoptotic cells. In addition, molecular analysis of genes by RT-PCR confirmed the high rate of cells that died by apoptosis as demonstrated by the histo-enzymatic method.Plusieurs études expérimentales et observations ont suggéré que les altérations de la fonction de reproduction mâle pourraient être dues à des facteurs toxiques présents dans notre environnement. Elles ont plus particulièrement incriminé des molécules d’origine industrielle ou anthropogénique regroupées sous le terme générique de perturbateurs endocriniens. Parmi les polluants incriminés, figurent de nombreux xénobiotiques tels que les solvants, les pesticides et les métaux lourds. Ils sont suspectés d’être responsables de la baisse de la fertilité masculine et féminine observée au cours de ce dernier siècle. Ainsi, afin d'explorer les effets du plomb sur les fonctions de reproduction endocrine et exocrine masculines, de jeunes rats mâles Wistar pubères ont reçu par voie orale 0,3 % d'acétate de plomb pendant 90 jours. Les rats témoins ont été traités dans les mêmes conditions mais n'ont reçu que de l'eau distillée. Après la période d’exposition, les rats ont été euthanasiés. Le sang des animaux a été prélevé, les testicules et l’épididyme ont été isolés en vue de la réalisation des tests spermiologiques, histopathologiques, biochimiques et des analyses moléculaires. Cette exposition chronique a induit sur le plan fonctionnel un changement significatif des paramètres spermatiques, la baisse des hormones sexuelles et la perturbation des étapes de la spermatogenèse chez les rats exposés au plomb. En outre, l’évaluation du statut oxydatif des rats de l’étude a révélé une augmentation du MDA dans le sérum et les homogénats testiculaires des rats exposés comparativement aux rats non-exposés. Sur le plan moléculaire, l’analyse par RT-PCR de l’activité des enzymes antioxydants (SOD, catalase, glutathion peroxydase) et des gènes impliqués dans le phénomène d’apoptose (P53, TNFα, Bcl2 Caspase-3) a montré une modification de l’expression des enzymes antioxydants et une baisse de l’activité des gènes impliqués dans la prolifération cellulaire chez les rats exposés comparativement aux rats non-exposés. Les différents travaux entrepris dans cette étude ont mis en exergue les effets délétères du plomb sur le système reproducteur mâle. A la lumière des données scientifiques rapportées, le plomb serait impliqué dans le déséquilibre de la balance oxydative conduisant à une réduction des paramètres spermiologiques, une désorganisation des structures testiculaires, une réduction de la production des spermatozoïdes ainsi que une augmentation des cellules apoptotiques. Par ailleurs, l’analyse moléculaire des gènes par RT-PCR a confirmé le taux élevé de cellules mortes par apoptose mise en évidence par la méthode histo-enzymatique