Bioprospecção de fungo com potencial de biodegradação do Bisfenol A: avaliação da metodologia de seleção

Trabalho de Conclusão de Curso II apresentado ao Instituto Latino-Americano de Ciências da vida e da natureza, da Universidade Federal da Integração Latino-Americana, como requisito parcial à obtenção do título de Bacharel em Biotecnologia Orientador: Profa. Dra. Rafaella C. Bonugli SantosUma grande quantidade de resíduos químicos industriais é gerada ao longo dos anos, sendo o bisfenol A (BFA) um dos resíduos de maior volume de produção atualmente em uso e faz parte da composição de diversos utensílios tais como: potes plásticos, garafas de água, revestimentos de proteção de embalagens, recipientes para alimentos e selantes em odontologia. Este composto pode gerar subprodutos tóxicos ao meio ambiente e a saúde humana, resultando na desregulação hormonal e efeitos mutagênicos. O presente projeto teve como objetivo avaliar metodologias viáveis para biodegradação do BFA a partir de linhagens isoladas do Parque Nacional do Iguaçu (PNI), um ambiente com características diferenciadas da composição do solo, de grande diversidade de espécies fúngicas e praticamente inexplorado. Inicialmente estudou-se qual o melhor método de diluição do BFA, uma partícula insolúvel em água. A menor concentração de solvente que permitiu a completa dissolução, mantendo suas características foi o etanol 10 %. Foi realizado o ensaio de toxicidade em Allium cepa visando avaliar a toxicidade do BFA para utilização como um bioindicador da biodegradação, entretanto, o método foi nocivo devido à presença do etanol 10 % na solução controle, o que descartou o efeito do solvente na toxicidade. A metodologia espectrometria UV-Vis foi otimizada identificando possíveis regiões de absorção entre 270 e 275 nm. Em adição, o crescimento fúngico (em peso seco) foi avaliado como método de seleção. Foram avaliados dois fungos: MD e EL na presença de 100 mg/L de BFA, sendo o MD o fungo selecionado para o ensaio de validação por apresentar o maior crescimento e a possível eliminação do BFA por via degradativa ou por adsorção. O fungo MD cultivado com apenas o BFA como fonte de carbono não obteve crescimento, necessitando de um meio que seja capaz de induzi-lo ao crescimento. Dessa forma, esse trabalho demonstrou boas perspectivas para a degradação desse resíduo em locais contaminados através dos fungos isolados do PNI, necessitando de novos ensaios para validar a metodologia de espectrometria, como uma análise cromatográficaA large amount of industrial chemical waste has generated over the years, and bisphenol A (BFA) is one of the largest production waste currently in use and is part of the composition of various utensils such as: plastic pots, water bottles, packaging protective coatings, food containers and sealants in dentistry. This compound can generate toxic by- products to the environment and human health, resulting in hormonal dysregulation and mutagenic effects. The objective of this project was to evaluate viable methodologies for BFA biodegradation from strains isolated from the Iguaçu National Park (INP), an environment with different soil composition characteristics, of the great diversity of fungal species and practically unexplored. Initially, the best method for diluting BFA, a water- insoluble particle, was studied. The lowest solvent concentration that allowed the complete dissolution while retaining its characteristics was 10% Ethanol. Allium cepa toxicity testing was performed to evaluate the toxicity of BFA for use as a degradation bioindicator, however, the method was harmful due to the presence of 10% Ethanol in the control solution, which ruled out the solvent effect on toxicity. The UV-Vis spectrometry methodology was optimized identifying possible absorption regions between 270 and 275 nm. In addition, fungal growth (dry weight) was evaluated as a selection method. Two fungi were evaluated: MD and EL in the presence of 100 mg / L BFA, being MD the fungus selected for the validation assay because of its higher growth and possible elimination of BFA by degradation or absorption. The MD fungus grown with only BFA as carbon source did not grow, requiring a medium that is able to induce it to grow. Thus, this work showed good prospects for the degradation of this residue in contaminated sites through isolated fungi of NIBP, requiring new assays to validate the spectrometry methodology, such as a chromatographic analysi