Measurement of anti-bovine serum albumin antibodies in dogs with chronic enteropathy

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina VeterináriaChronic Enteropathy (CE) is a complex disease that is thought to result from an overstated immune response against alimentary and microbiota antigens in susceptible animals. The amplified inflammation of the mucosa promoted by the increased and abnormal gut permeability in sick patients known as ‘leaky gut’, allows the antigens to pass through the systemic circulation, culminating in an unbalanced excessive immune response that is followed by the production of specific Immunoglobulins (Ig). Bovine protein is historically believed to be one of the highest immune triggers in dogs with CE. However, studies about the use of anti-bovine serum albumin antibodies (anti-BSAA) as potential biomarkers of a disrupted immune-response in dogs with CE are lacking. This study aimed to compare anti-BSA antibody values (IgA/IgG) between healthy dogs and dogs diagnosed with CE, assessing its potential utility as a biomarker of a leaky gut. A case-control study was conducted including a total of 21 dogs, divided into two distinct groups. The first group consisted on 8 client-owned healthy adult dogs (control group), fed with current adult standard dry diet; the second group was composed by 13 client-owned dogs with clinical signs of CE that historically contacted with standard diets of bovine-protein but were latter fed with an hydrolyzed bovine-free diet for at least two weeks. Serum samples were obtained and anti-BSA Antibodies (IgA/IgG) measured, using a species-specific ELISA kit. There was no significant difference on IgA levels between groups (p= 0,119). Concerning IgG, serial titers were lower in diseased dogs, when compared to the control group (P=0.046). Anti-BSAA do not seem to be good biomarkers of “leaky gut”. A possible explanation for the fact that IgG levels are higher in healthy dogs relies on the diet protein source, which can contain bovine extracts. Assuming that diseased dogs had previously contacted with bovine-proteins, other possibility is that dogs with chronic enteropathy are not able to produce enough immune-globulins, showing a poor humoral immunity towards bovine antigens. Accordingly to previous studies, these results also disbelieves the use of serologic serum profiles to assess potential dietary antigenicity. Albeit bovine protein is historically believed to be one of the highest immune triggers in dogs with CE, these preliminary results supports that anti-BSAA do not seem to be good biomarkers of a “leaky gut”. Further studies are needed to evaluate if low-IgG levels can be related with a poor humoral immune response in dogs with CE.RESUMO - DETECÇÃO E DOSEAMENTO DE ANTICORPOS SÉRICOS ANTI-ALBUMINA BOVINA EM CÃES COM ENTEROPATIA CRÓNICA - A Enteropatia crónica (EC) é uma doença complexa e multifatorial que se acredita ser resultado de uma resposta imunitária exacerbada a antigénios alimentares e/ou microbianos em animais geneticamente suscetíveis. A inflamação da mucosa intestinal é resultante de uma permeabilidade aumentada da barreira intestinal, o que permite a passagem de antigénios do lúmen para a circulação sistémica. Esta alteração culmina numa resposta imunitária exacerbada com consequente produção inapropriada de imunoglobulinas especificas. A proteína bovina é atualmente aceite como um dos principais desencadeadores imunitários em cães com EC. O presente estudo visa comparar os valores de anticorpos específicos anti-BSA (IgA/IgG) em cães saudáveis e em cães diagnosticados com EC, estimando a potencial utilidade destes como biomarcador de alteração de permeabilidade intestinal (“leaky gut”). Foi efetuado um estudo do tipo caso-controlo que incluiu um total de 21 cães. Estes foram divididos em 2 grupos: grupo controlo (constituído por 8 cães adultos clinicamente saudáveis e alimentados com ração standard para adultos) e um grupo composto por 13 cães com sinais clínicos de EC. Em ambos os grupos foram medidos os anticorpos anti-BSA, através das amostras de soro obtidas e recorrendo a um kit ELISA espécie-específico. Relativamente aos níveis séricos de IgA, não houve diferença significativa entre os dois grupos (p=0,119). No entanto, os níveis de IgG foram significativamente inferiores em cães com EC, quando comparados ao grupo de controlo (p=0,046). O decréscimo observado em cães com EC pode ser explicado por uma eventual produção insuficiente de imunoglobulinas, consequente de uma fraca resposta humoral em relação aos antigénios bovinos. Outra possível explicação para o facto de os níveis de IgG serem mais elevados em cães saudáveis pode residir na origem da proteína animal da dieta, que poderá conter extratos bovinos. Embora se defenda que a proteína bovina seja um dos maiores estímulos imunitários em cães com EC, estes resultados sustentam que os anticorpos anti-BSA não aparentam ser biomarcadores adequados a esta condição. Este trabalho corrobora estudos anteriores que questionam o uso de perfis séricos sorológicos para avaliar a potencial antigenicidade alimentar. São necessários mais estudos para esclarecer se baixos títulos de IgG poderão estar relacionados com uma deficiente resposta imune humoral em cães com CE.N/