Cinéticas de crescimento do ciclo da Leishmania (Leishmania) chagasi em cultura de células McCoy

The kinetics of growth of Leishmania performed in vitro after internalization of the promastigote form in the cell and the occurrence of the transformation of the parasite into the amastigote form have been described by several authors. They used explants of macrophages in hamster spleen cell culture or in a human macrophage lineage cell, the U937. Using microscopy, the description of morphologic inter-relationship and the analysis of the production of specific molecules, it has been possible to define some of the peculiarities of the biology of the parasite. The present study shows the growth cycle of Leishmania chagasi during the observation of kinetic analysis undertaken with a McCoy cell lineage that lasted for a period of 144 hours. During the process, the morphologic transformation was revealed by indirect immunofluorescence (IF) and the molecules liberated in the extra cellular medium were observed by SDS-PAGE at 24-hour intervals during the whole 144-hour period. It was observed that in the first 72 hours the promastigote form of L. chagasi adhered to the cell membranes and assumed a rounded (amastigote-like) form. At 96 hours the infected cells showed morphologic alterations; at 120 hours the cells had liberated soluble fluorescent antigens into the extra cellular medium. At 144 hours, new elongated forms of the parasites, similar to promastigotes, were observed. In the SDS-PAGE, specific molecular weight proteins were observed at each point of the kinetic analysis showing that the McCoy cell imitates the macrophage and may be considered a useful model for the study of the infection of the Leishmania/cell binomial.Cinéticas de crescimento de Leishmania realizadas in vitro após a internalização da forma promastigota na célula e a ocorrência da transformação do parasito na forma amastigota foram descritas por vários autores, seja com a utilização de explantes de macrófagos em células de baço de hamster ou atualmente da célula de linhagem de macrófago humano U937. Aliando a microscopia à descrição das inter-relações morfológicas e à síntese de moléculas específicas foi possível esclarecer pontos sobre a biologia do parasito. O presente estudo mostra o acompanhamento do ciclo de crescimento da Leishmania chagasi em uma cinética realizada com células de linhagem McCoy, no período de 144 horas. Durante o processo, as transformações morfológicas foram reveladas pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e as moléculas liberadas no meio extracelular foram observadas pelo método de SDS-PAGE, em intervalos de 24 horas no período de 144 horas. Observou-se que nas primeiras 72 horas, a forma promastigota da L. chagasi fica aderida à membrana das células com aspecto arredondado (amastigota-like). Em 96 horas as células infectadas apresentaram alterações morfológicas; em 120 horas, as células liberaram, para o meio extracelular, antígenos fluorescentes solúveis; e em 144 horas foram observadas novas formas alongadas dos parasitos como se fossem promastigotas. No SDS-PAGE, proteínas com pesos moleculares específicos são observadas em cada ponto da cinética, mostrando que a célula McCoy parece mimetizar o macrófago e que pode ser um modelo útil para o estudo da infecção do binômio leishmânia/célula