Viabilidad y colonización de la Cepa Vacunal Vibrio Cholerae 638 liofilizada en dos formulaciones y almacenada a diferentes temperaturas

Una vacuna efectiva contra el cólera debe ser suministrada por vía oral. En este tipo de vacunas es muy importante conservar el microorganismo a concentraciones conocidas por períodos prolongados. La liofilización es el método ideal para lograr este objetivo, sin embargo, durante este proceso ocurren pérdidas considerables en la viabilidad de los microorganismos, por lo que se deben utilizar sustancias lioprotectoras que minimicen estas pérdidas. La viabilidad de la cepa vacunal y su capacidad de colonización son aspectos importantes para lograr la inmunogenicidad y por tanto la eficacia de la vacuna. Para la realización de este trabajo utilizamos la cepa vacunal 638, Vibrio cholerae O1, El Tor Ogawa, liofilizada en las formulaciones F1 (lactosa, peptona, sorbitol) y F9 (leche descremada, peptona, sorbitol). Se estudiaron muestras de lotes liofilizados y almacenados a 8 y -20ºC por períodos de tiempo de 6 meses y 1 año. Al cabo de dichos tiempos, se evaluó la pérdida de viabilidad y la capacidad de colonización de dicha cepa. También se analizó la actividad celulolítica (celA) de los productos liofilizados. La viabilidad de la cepa liofilizada en F9 y almacenada a las diferentes temperaturas y tiempos fue ligeramente menor que en la F1. La actividad celA de la cepa vacunal, conservada y almacenada en estas condiciones, fue detectada en el 100% de las colonias analizadas. La cepa 638 colonizó el intestino de la mayoría de los ratones al cabo de las 24h de inoculados, excepto cuando se utilizó la cepa liofilizada en F9 y almacenada a 8ºC durante 1 año. No obstante, a las 120h se alcanzaron los niveles máximos de colonización observados para esta cepa en estudios previos sin liofilizar. Teniendo en cuenta todo lo anterior, ambas formulaciones mantienen, en niveles aceptables, la viabilidad, y la capacidad colonizadora de la cepa vacunal 638, almacenada hasta 1 año