Expresión extracromosomal del antígeno pertactina en Escherichia coli y Bordetella pertussis

Bordetella pertussis es el agente causal de la tos ferina o pertussis, una enfermedad respiratoria altamente contagiosa. Aunque las primeras vacunas contra esta enfermedad eran de células muertas, muchos países actualmente emplean variantes acelulares menos reactogénicas y más eficaces. La pertactina (Prn) es uno de los antígenos de B. pertussis implicados en la inmunidad protectora de la mayoría de estas vacunas acelulares. Prn es una proteína autotransportadora y polimórfica de aproximadamente 60 kDa. Han sido descritas 13 variantes diferentes, de las cuales Prn1 y Prn2 son dos de las más estudiadas. Para la obtención de los componentes de estas vacunas es necesario desarrollar sistemas de elevados niveles de expresión de los antígenos. Una de las estrategias seguidas con este fin es aumentar los niveles de transcripción de los genes que codifican para estas proteínas y su número de copias en la célula. En este trabajo fueron insertados los genes prn1 y prn2 en el vector de amplio rango de hospederos pMMB67EH bajo la regulación de los promotores de fhaB y tac. Como resultado fueron obtenidas cepas de B. pertussis capaces de expresar entre 11 y 23 veces más Prn que cepas salvajes analizadas, además de cepas de Escherichia coli en las que esta proteína está asociada a la superficie celular. La detección y cuantificación de Prn fueron realizadas mediante ELISA