Adaptation de la production de cellules souches mésenchymateuses nasales aux bonnes pratiques de fabrication en vue de la mise en place d'une étude clinique pilote de réparation des lésions traumatiques des nerfs périphériques

Médecine. Biologie médicaleINTRODUCTION : la réparation des lésions traumatiques des nerfs périphériques a bénéficié de l’apport des techniques microchirurgicales depuis la fin des années 1960. Malgré les progrès actuels, les résultats fonctionnels restent le plus souvent incomplets chez l’adulte. Dans ce contexte, la thérapie cellulaire apparaît prometteuse. Les cellules souches mésenchymateuses de la cavité nasale sont intéressantes à divers titres : capacité de transformation en cellules de Schwann et/ou en cellules neurales lors de la transplantation dans le système nerveux, actions immuno-modulatrices, sécrétion de facteurs impliqués dans la croissance et le guidage axonaux. Un prérequis à l’utilisation thérapeutique de ces cellules est le transfert des conditions d’isolement et de culture employées en recherche aux bonnes pratiques de fabrication. METHODE : a partir d’une biopsie de muqueuse olfactive effectuée sous contrôle endoscopique au niveau des cornets moyens de patients volontaires, les cellules souches mésenchymateuses nasales ont été extraites, cultivées puis contrôlées. RESULTATS : de décembre 2018 à août 2019, quatre patients à savoir trois femmes et un homme, de 20 à 59 ans (moyenne d’âge : 38,5 ans) ont été inclus dans l’étude. Les prélèvements ont été réalisés sous anesthésie générale. Aucun saignement persistant après le geste n’a été observé. Les cellules ont été amplifiées ex vivo suivant des conditions de grade pharmaceutique. A l’issue du premier passage, les valeurs moyennes du temps de culture, de la numération, de la viabilité, de la pureté cellulaires ainsi que de la clonogénicité des progéniteurs CFU-F ont été estimées respectivement à 17,8 jours (ET : 2,5) ; à 12 537 500 (ET : 2 847 038) ; à 98,5 % (ET : 0,3) ; à 85,4 % (ET : 10,2) et à 15,5 % ; la stérilité des cultures a également été mise en évidence. Les analyses cytogénétiques n’ont pas montré de remaniement. CONCLUSION : ces données préliminaires nous permettront d’envisager un essai de phase I, dont le but sera d’évaluer la tolérance de la transplantation autologue de cellules souches mésenchymateuses nasales après sections négligées de nerfs périphériques sensitifs : nerfs collatéraux digitaux et branche sensitive du nerf radial.Summary : despite progress in the time taken to take charge and in the quality of the surgical technique, the repair of damaged peripheral nerves has not improved in the last fifty years. Faced with these limitations of surgical treatment, multidisciplinary teams from Marseille and Rouen have come together to propose an innovative approach to cell therapy that can limit inflammation and improve axonal growth. Cell transplantation now appears as an alternative to treat nerve damage. Scientific advances have shown in animal models as well as in humans that mesenchymal stem cells are good cellular candidates for supporting nerve regeneration after transplantation. On the other hand, their collection requires an invasive sample most often of bone marrow. A new stem cell candidate capable of stimulating nerve regeneration has recently been identified in the olfactory mucosa located in the nasal cavity. These cells are part of the ecto-mesenchymal stem cell family. They have biological characteristics very similar to those of mesenchymal stem cells of the bone marrow. They exhibit high mitogenic activity and have a high potential for differentiation towards neural lineages. Given their properties and ease of access within the nasal cavity, ecto-mesenchymal stem cells offer new perspectives for cell therapy targeting nerve damage.In this context, nasal ecto-mesenchymal stem cells represent an interesting reconstruction alternative, particularly in the indication of peripheral nerve lesions. They are directly and easily accessible to any individual. We therefore propose in this study to validate a method of manufacturing isolated stem cells from a biopsy of a few cubic millimeters of the nasal cavity of adults, taken during a surgical procedure, with a view to proposing shortly an innovative cell therapy. From each nasal biopsy taken, the cells will be amplified in vitro under pharmaceutical grade conditions and then controlled, validated and characterized in particular for their lack of genetic instability. This study requires the taking of 25 biopsies of nasal mucosa taken from adults to document the reproducibility of the manufacturing process and possible inter-donor variations. This validation data is an essential step before considering a clinical trial of Innovative Cell Therapy Drugs