Fitaz enziminin immobilizasyonu, karakterizasyonu ve fitat degradasyonunda kullanımı

Fitazlar (EC 3.1.3.26, myo-inozitol hegzakisfosfat fosfohidrolaz) fitik asidin bir ya da daha fazla inorganik fosfata hidroliz reaksiyonlarını katalizlerler. Doğada yaygın olarak bitkilerde, mikroorganizmalarda ve bazı hayvansal dokularda bulunan fitazlar özellikle gıda ve yem sanayisinde önemli uygulama alanlarına sahiptirler. Fitatın fitazlarla enzimatik degradasyonu gıda bileşenlerine olumsuz bir etki yapmadığı ve insan beslenmesinde özellikle mineral alınımını arttırmada önemli rol oynadığı için son yıllarda fitazlara olan ilgi artmıştır. Buna rağmen enzim ile yapılan immobilizasyon çalışmaları yok denecek kadar azdır. Bu çalışmada, soya filizi ve avokadodan kısmi olarak saflaştırılan fitaz enzimi epoksi aktif grup taşıyan Sepabead EC-EP taşıyıcıda kovalent bağlama ile immobilize edilmiştir. Epoksi taşıyıcılar nötral pHʼ da oldukça kararlı olmaları, uzun süre saklanabilmeleri, enzim taşıyıcı bağının yüksek kararlılığı ve geride kalan boş uçların bloklanabilmesi nedeniyle tercih edilmektedirler. Serbest ve immobilize enzimlerin fiziksel ve kimyasal karakterizasyonu gerçekleştirilmiştir. Enzim aktivitesine etki eden bazı parametreler (pH, sıcaklık, substrat konsantrasyonu, efektör konsantasyonları) incelenerek kararlılık testleri (pH, termal, operasyonel ve depo kararlılığı) yapılmıştır. Bunların yanı sıra immobilize enzimlerin tekrar kullanılabilirliği de test edilmiştir. Serbest ve immobilize fitaz enzimleri soya sütü fitatının degradasyonunda kullanılmıştır