Investigation of glycopeptid resistance in methicillin resistant staphylococcal isolates

Günümüzde vankomisine orta düzeyde dirençli S.aureus (VISA) ve heterojen dirençli S.aureus (hVISA) suşlarının ortaya çıkmış olması tedavide büyük sorunlar yaratmaktadır. Bu çalışmada metisiline dirençli Staphylococcus aureus (MRSA) ve koagülaz-negatif stafilokok (MRKNS) klinik izolatlarında glikopeptid direncinin araştırılması amaçlanmıştır. Çalışmaya, Celal Bayar Üniversitesi Tıp Fakültesi Mikrobiyoloji ve Klinik Mikrobiyoloji Anabilim Dalı Bakteriyoloji Laboratuvarı’nda Haziran 2005-Aralık 2006 tarihleri arasında çeşitli klinik örneklerden (trakeal aspirat, kan, abse, yara sürüntüsü, balgam, kateter ucu, vb) izole edilen 120 stafilokok suşu (92 MRSA, 28 MRKNS) alınmıştır. Glikopeptid direnci 6 ?g/mL vankomisin içeren beyin-kalp infüzyon agar plakları kullanılarak agar tarama testi ile araştırılmıştır. Agar tarama yöntemi ile elde edilen 17 (%14) stafilokok suşuna (10 MRSA, 7 MRKNS) standart E-test ve makro E-test yöntemi uygulanmıştır. Çalışmamızda, standart E-test yöntemiyle izolatların vankomisin minimum inhibisyon konsantrasyon (MİK) aralığı 1.5-4 ?g/mL, teikoplanin MİK aralığı ise 2-4 ?g/mL olarak bulunmuştur. Vankomisin ve teikoplanin MİK değerleri ?8 ?g/mL veya sadece teikoplanin MİK değeri ?12 ?g/mL olan suşlar hVISA olarak kabul edildiğinde, çalışmamızda VISA ve hVISA izolatına rastlanmamıştır. Sonuç olarak uygulama kolaylığı ve düşük maliyeti nedeniyle rutin laboratuvarlarda tercih edilen ancak özgüllük ve duyarlılığı E-test yöntemine göre oldukça düşük olan agar tarama yönteminin, vankomisin direncinin araştırılmasında güvenilir olmayabileceği ve ülkemizdeki stafilokok izolatlarında vankomisine direnç durumunun belirlenmesi için standart yöntemlerin kullanıldığı çok merkezli çalışmalara ihtiyaç olduğu düşünülmüştür.The emergence of Staphylococcus aureus strains with intermediate resistance (VISA) and heterogen resistance (hVISA) to vancomycin leads to the occurence of severe therapeutic problems. The aim of this study was to investigate the vancomycin resistance in methicillin resistant S.aureus (MRSA) and coagulase-negative staphylococci (MRCoNS) isolated from clinical samples in Bacteriology Laboratory of Microbiology and Clinical Microbiology Department of Celal Bayar University Faculty of Medicine, Manisa (located in western Anatolia, Turkey). A total of 120 staphyloccoccal strains (92 MRSA and 28 MRCoNS) isolated from different clinical specimens (tracheal aspirate, blood, abscess, wound swabs, sputum, catheter tips, etc) between the period of June 2005 to December 2006 were included to the study. Vancomycin resistance were determined by agar screening method using brain hearth infusion agar plates containing 6 μg/mL vancomycin. Standard E-test and macro E-test methods were performed for 17 (14%) staphylococcal strains (10 MRSA and 7 MRCoNS) which had grown in agar screening plates. Vancomycin and teicoplanin minimal inhibitory concentration (MIC) ranges of those strains were found as 1.5-4 μg/mL and 2-4 μg/mL, respectively, by standard E-test method. In our study, no VISA and hVISA isolates were detected when MIC value of ≥8 μg/mL for vancomycin and teicoplanin, or ≥12 μg/mL for teicoplanin only were accepted as the criteria for hVISA determination. Agar screening method which is preferably used in routine laboratories for practical and economical reasons, lower sensitivity and specificity than E-test. It can be concluded that, since agar screening method is not reliable for the detection of vancomycin resistance, further multi-center studies with the use of standard methods are needed in order to clarify the vancomycin resistance patterns of staphylococci in our country