Studying the role of the filopodial regulator, MYO10, in transzonal projections dynamics in the mouse ovarian follicle

Folliculogenesis encompasses the process of oocyte development, allowing for the growth and maturation of a competent oocyte. Communication between the oocyte and the somatic granulosa cells surrounding it is crucial for the success of this process. Throughout growth, a thick extra-cellular layer termed the zona pellucida is present between the granulosa cells and the oocyte. In order to maintain communication between the two, granulosa cells establish physical contact with the oocyte via actin-containing filopodia-like structures known as transzonal projections (TZPs). These projections allow the direct transfer of nutrients and regulatory signals from the granulosa cells to the oocyte. Given that myosin 10 (MYO10) is a key regulator of filopodial formation in other cell types, I investigated the potential role of MYO10 in TZP dynamics in mouse ovarian follicles. Using immunofluorescence, populations of MYO10 foci were observed at three discrete locations in follicles throughout oocyte growth. Small foci were detected at the cortex of the oocyte and within the zona pellucida. A smaller number of much larger foci were found at the oocyte-facing side of the innermost layer of granulosa cells. Oocyte meiotic maturation resulted in the loss of the small foci of the zona pellucida and cortical foci. RNAi-mediated depletion of Myo10 in the oocyte led to a decrease in the number of small foci at the oocyte cortex and in the zona pellucida as well. These results suggest that the two populations of small foci originate from the oocyte. However, a parallel decrease in the number of TZPs was not observed with the RNAi-mediated depletion of Myo10 in the oocyte. Future studies will be directed toward understanding the role of these three populations of MYO10 foci in the generation or function of TZPs. Research in this field will allow for potential improvements to assisted reproductive technologies.La folliculogenèse englobe le processus de développement de l'ovocyte, permettant ainsi la croissance et la maturation d'un ovocyte compétent. La communication entre l'ovocyte et les cellules somatiques de la granulosa qui l'entourent est cruciale pour le succès de ce processus. Tout au long de la croissance, une couche extracellulaire épaisse, appelée zone pellucide, est présente entre les cellules de la granulosa et l'ovocyte. Afin de maintenir la communication entre les deux, les cellules de la granulosa établissent un contact physique avec l'ovocyte via des structures ressemblant à des filopodes contenant de l'actine, appelées projections transzonales (TZP). Ces projections permettent de transférer directement des nutriments et des signaux régulateurs des cellules de la granulosa à l'ovocyte. Étant donné que la myosine 10 (MYO10) est un régulateur clé de la formation de filopodes dans d'autres types de cellules, j'ai étudié le rôle potentiel de MYO10 dans la dynamique du TZP dans les follicules ovariens de la souris. En utilisant l’immunofluorescence, des populations de foyers MYO10 ont été observées à trois endroits distincts dans les follicules pendant la croissance des ovocytes. De petits foyers ont été détectés dans le cortex de l'ovocyte et dans la zone pellucide. Un plus petit nombre de foyers beaucoup plus grands ont été trouvés dans la couche la plus interne des cellules de la granulosa, faisant face à aux ovocytes. La maturation nucléaire ovocytaire des ovocytes a entraîné la perte des petits foyers de la zone pellucide et du cortex. La déplétion de Myo10 produit par l'ARNi dans l'ovocyte a entraîné une diminution du nombre de petits foyers dans le cortex de l'ovocyte et dans la zone pellucide. Ces résultats suggèrent que les deux populations de petits foyers proviennent de l'ovocyte. Cependant, une diminution du nombre de TZPs n’a pas été observée avec la dépletion de Myo10 induite par l’ARNi dans l’ovocyte. Les prochaines études viseront à comprendre le rôle de ces trois populations de foyers MYO10 dans la génération ou dans la fonction des TZP. La recherche dans ce domaine permettra potentiellement d’améliorer les technologies de procréation assistée