Estudo descritivo e comparativo da arquitetura de córneas humanas normais no envelhecimento

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2019.Introdução: A córnea é uma estrutura complexa responsável por quase três quartos do poder óptico o que torna a córnea a principal lente do olho humano, além de conferir uma barreira de proteção a agentes externos, permite a transmissão e a refração da luz. Tem sido reportado que o processo normal de envelhecimento pode afetar a integridade da córnea. Assim, esse estudo teve como objetivo comparar e descrever a arquitetura e as alterações estruturais, vasculares e imunitárias da córnea decorrentes do envelhecimento para auxiliar condutas terapêuticas em benefício da qualidade visual dos indivíduos. Materiais e Métodos: Trata-se de um estudo transversal descritivo e comparativo da arquitetura estrutural de córneas humanas normais (n = 15) sem histórico de doenças oculares, descartadas pelo Banco de Olhos. As córneas foram coletadas em solução de preservação, fixadas com paraformaldeído a 10%, lavadas e seccionadas. Um quadrante de cada espécimes (n=15) foram re-fixados (glutaraldeído a 2% e paraformaldeído a 2%, lavados, pós-fixados (tetróxido de ósmio a 1%), desidratados em soluções de acetona (30% a 100%), secos até o ponto crítico com CO2 e metalizados com ouro. As imagens das faces anterior, perfil e posterior foram obtidas por microscopia eletrônica de varredura (JSM- 7000F, JEOL, Tokyo, Japan). Três quadrantes de cada espécime (n=9) foram fixados, desidratados em álcool, diafanizados em xilol, embebidos e emblocados em parafina, seccionados em cortes frontais e sequenciados (6 μm), após corados com hematoxilina e eosina , Tricromio de Gomori, Gomori para reticulina e Weigert. Resultados: O perfil dos doadores mostrou predomínio sexo masculino (80%), sorologias negativas em cerca de 73,3% e doenças cardiovasculares sendo a causa mortis mais prevalente. Os resultados mostraram em relação a idade: 1) a espessura total da córnea na córnea central (CC) é menor que na córnea periférica (CP) para G1 (<40anos) (Teste t, p=0,049), não houve diferença para G2 (≥ 40 anos). 2) Camada de Bowman, membrana de Descemet e endotélio mostraram maior espessura CP para G1 (p<0,01); para G2 foi mais espessa na CP apenas na Camada de Bowman (Test t, p=0,049). 3) A espessura do endotélio na CP foi menor no G2 do que no G1 (Test t, p=0,015). 4) O percentual de desepitelização, assim como o total de lamelas desagregadas não apresentaram diferenças significativas entre os grupo ou/e regiões. 5) O número de lesões endoteliais foi maior no G2 em comparação ao G1 (Test t, p<0,05). 7) O número de leucócitos segmentados foi maior no G1 em relação ao G2 (Test t, p=0,023). 8) Fenestrações pericorneais margeadas por fibras colágenas e por fibras elásticas internamente foram identificadas em maior quantia na região posterior da córnea próximo ao ângulo iridocorneano aonde se integram com a rede trabecular, Discussão e Conclusão: O presente estudo mostrou alterações estruturais nos constituintes da córnea com o envelhecimento. Essas alterações podem refletir na perda da transparência da córnea observada nos idosos, sobretudo pela diminuição funcional do seu endotélio. Diferentemente de outros estudos, os cortes frontais e sequenciados permitiram avaliar as fibras elásticas no perímetro corneano que são de suma importância para num futuro próximo identificar a interrelação córnea – limbo – malha trabecular e prováveis avanços nas áreas do glaucoma e no estudo da córnea humana e assim contribuir para melhorar as condutas terapêuticas em benefício da qualidade visual dos indivíduos ao longo do processo de envelhecimento.Introduction: The cornea is a complex structure responsible for nearly three-quarters of optical power making the cornea the main refracting lens in the human eye, as well as providing a protective barrier for external agents it allows the transmission and refraction of light. It has been reported that the normal aging process can affect the integrity of the cornea. Thus, this study aimed at comparing and describing the architecture and structural, vascular and immune changes of the cornea resulting from aging to assist therapeutic behaviors in benefit of the visual quality of the individuals. Materials and Methods: This is a crosssectional descriptive and comparative study of the structural architecture of normal human corneas (n = 15), with no history of ocular diseases, discarded by Eye Bank. The corneas were collected in preservation solution, fixed with 10% paraformaldehyde, washed and sectioned. One quadrant of each specimen were then re-fixed (2% glutaraldehyde and 2% paraformaldehyde), washed, post-fixed (1% osmium tetroxide), dehydrated in acetone solutions (30% to 100%), dried to critical point with CO2 and metalized with gold. Images of the anterior, transversal and posterior faces were obtained by scanning electron microscopy (JSM-7000F, JEOL, Tokyo, Japan). Three quadrants of each specimen (n = 9) were fixed, dehydrated in alcohol, diaphanized in xylol, embedded and blocked in paraffin, sectioned in frontal cuts and sequenced (6 μm) after staining with hematoxylin and eosin, Gomori trichrome, Gomori for reticulin and Weigert. Results: The profile of the donors showed a predominance of masculine sex (80%), negative serologies in 73.3% and cardiovascular diseases being the most prevalent cause. The results showed: 1) total cornea thickness in the central cornea (CC) is smaller than in the peripheral cornea (CP) for G1 (<40 years) (Test t, p = 0.049), there was no difference for G2 (≥ 40 years). 2) Bowman's layer, Descemet's membrane and endothelium showed higher CP thickness for G1 (p <0.01); for G2 was thicker in CP only in the Bowman's Layer (Test t, p = 0.049). 3) The endothelium thickness at CP was lower in G2 than in G1 (Test t, p = 0.015). 4) The percentage of de-epithelialization, as well as the total of disaggregated lamellae did not present significant differences between the groups or / and regions. 5) The number of endothelial lesions was higher in G2 than in G1 (Test t, p