Técnicas moleculares para el diagnóstico de la enfermedad de chagas | Molecular techniques for the diagnosis of chagas disease

RESUMENLa enfermedad de Chagas es causada por el parásito Trypanosoma cruzi y comprende una fase aguda, seguida de una fase crónica, con una parasitemia escasa y una clínica que va desde la ausencia de síntomas hasta una cardiopatía severa. El diagnóstico presenta limitaciones, debido a la baja sensibilidad de las técnicas parasitológicas y la baja especificidad de las inmunológicas. Las técnicas moleculares, especialmente la PCR, que detecta secuencias específicas de ADN del parásito, es una alternativa. Se han descrito varias dianas de amplificación, siendo las más utilizadas, por su alta sensibilidad y especificidad, las PCR que amplifican el ADN satélite y el ADN de minicírculo de kinetoplasto de T. cruzi. Aunque la técnica de PCR también tiene algunas limitaciones en cuanto a costo, infraestructura necesaria y sensibilidad en fase crónica de la enfermedad, tiene muchas ventajas especialmente en casos agudos, en Chagas congénito, en inmunodeficiencias y resultan adecuadas en la evaluación y seguimiento del tratamiento. Se han desarrollado algunas variantes más avanzadas como PCR a tiempo real, la amplificación isotérmica y la detección de los productos de PCR mediante tiras cromatográficas. Lo más adecuado sería combinar el uso de las técnicas parasitológicas, inmunológicas y moleculares de acuerdo a la fase de la enfermedad que se sospecha y las características del paciente. En Venezuela, las técnicas moleculares para el diagnóstico de la enfermedad de Chagas, solo se utilizan en laboratorios de investigación, sería recomendable su incorporación al grupo de pruebas diagnósticas de la enfermedad de Chagas en el país.Palabras clave: Trypanosoma cruzi, PCR, ADN.ABSTRACTChagas disease is caused by the parasite Trypanosoma cruzi and includes an acute phase followed by a chronic phase, with low parasitemia and clinical manifestations range from no symptoms to severe heart disease. Diagnosis has limitations due to the low sensitivity of the parasitological techniques and the low specificity of immunological ones. Molecular techniques, especially PCR, that detects specific DNA sequences of the parasite, is an alternative. Several targets have been described for amplification, the most used because of its high sensitivity and specificity are the PCR that amplified satellite DNA and minicircle kinetoplast DNA of T. cruzi. Although the PCR technique also has some limitations in terms of cost, infrastructure needed and sensitivity in the chronic phase of the disease, has many advantages, especially in acute cases, congenital Chagas, in immunodeficiencies and are appropriate in the evaluation and monitoring of treatment. More advanced variants have been developed, such as; real time PCR, isothermal amplification and detection of PCR products by chromatographic strips. It would be appropriate to combine the use of parasitological, immunological and molecular techniques according to the suspected phase of the disease and patient characteristics. In Venezuela, the molecular techniques for diagnosis of Chagas disease are only used in research laboratories. It would be advisable to incorporate the molecular diagnostic tests to the group of techniques.for diagnosis of Chagas disease in the country.Key words: Trypanosoma cruzi, PCR, DNA