ОСОБЛИВОСТІ ОТРИМАННЯ АСЕПТИЧНОЇ КУЛЬТУРИ THUJA OCCIDENTALIS L. В УМОВАХ IN VITRO

Thuja occidentalis L. has been widely cultivated in Europe and Ukraine since the end of 18th century. The considerable economic value of the investigated species predetermines expediency of improvement of modern reproduction methodologies, in particular in the in vitro conditions. Experimental researches on obtaining of sterile culture of western Тhuja were conducted in laboratory of tissue culture at the Forestry and Forest Selection Department of UNFU according to generally accepted methods in biotechnology. Decontamination of explants was executed by till of vegetable material by the next sterilizing agents of different concentration and in different combinations: Н2О with "Twin 80"(2, 4, 6 hours); Н2О2 (1, 2, 3 %; 3, 5, 10 minutes); С2Н5ОН (50, 70, 96 %; 5, 10, 15 seconds); NaClO (10, 20, 30 %; 3, 5, 7 minutes); AgNO3 (0.1, 0.2, 0.3 %; 5, 10, 15 minutes); HgCl2 (1, 2, 3 %; 5, 10, 15 minutes). For elimination of internal infections of explants before seating processed 0.1 % water solution to the antibiotic of Imaninum, sterile explants were placed on the nourishing environment of MS (Murashige and Skoog). On the basis of the results obtained we determined the efficiency of sterilization and viability of explants. Decontamination of explants was executed in two stages: "primary sterilization" and "modified sterilization". We got most of aseptic vegetable material (52.9 %) on the first stage at the next chart of sterilization: С2Н5ОН (96 %, 5 seconds) + Н2О (6 hours) + Н2О2 (3 %, 10 minutes) С2Н5ОН (70 %, 5 seconds). In order to increase the results obtained there was the tested chart of decontamination, that included for itself obligatory application of "primary sterilization" and combinations all three chemical agents (NaClO, AgNO3, HgCl2), and there by turn exception. The greatest investigated indexes (efficiency of sterilization – 89.33±0.83 % and viability of explants – 87.67±1.00 %) were obtained during sterilization of explants of western Тhuja according to the following scheme: С2Н5ОН (96 %, 5 seconds) + Н2О (6 hours) + Н2О2 (3 %, 10 minutes) + С2Н5ОН (70 %, 5 seconds) + AgNO3 (0.2 %, 10 minutes) + HgCl2 (1 %, 10 minutes). As a result of undertaken studies it is possible to draw conclusion about considerable influence, concentrations, duration of till, combination and type of the applied chemical agents on the results of sterilization of vegetable feedstock of Thuja occidentalis L. at reproduction in vitro.Приведены обзор и анализ литературных источников, касающихся микроклонального размножения Thuja occidentalis L. в условиях in vitro. Кратко охарактеризована хозяйственная ценность исследуемого вида и, на основе этого, обоснована целесообразность проведения запланированных исследований. Представлен список наиболее распространенных в садово-парковом хозяйстве декоративных форм Thuja occidentalis L. Подробно охарактеризована примененная методика проведения экспериментальных исследований по получению асептической культуры Thuja occidentalis L. при размножении in vitro: химические реактивы, которыми выполняли деконтаминацию выходных эксплантов, их концентрации и комбинации. Протестирован ряд схем выполнения деконтаминации эксплантов изучаемого вида с применением одного химического агента и различных их комбинаций. Определена оптимальная схема проведения ступенчатой стерилизации исходных эксплантов Thuja occidentalis L. для размножения in vitro, которая обеспечила выход 87,67±1,00 % жизнеспособного растительного материала и заключается в последовательной его обработке следующими химическими агентами: С2Н5ОН (96 %, 5 с) + Н2О с моющим средством (6 ч) + Н2О2 (3 %, 10 мин.) + С2Н5ОН (70 %, 5 с) + AgNO3 (0,2 %, 10 мин) + HgCl2 (1 %, 10 мин). Обобщены и проанализированы полученные результаты.Наведено огляд та аналіз літературних джерел, які стосуються мікроклонального розмноження Thuja occidentalis L. в умовах in vitro. Коротко охарактеризовано господарську цінність досліджуваного виду та, на основі цього, обґрунтовано доцільність проведення запланованих досліджень. Подано список найпоширеніших у садово-парковому господарстві декоративних форм Thuja occidentalis L. Детально охарактеризовано застосовану методику проведення експериментальних досліджень з отримання асептичної культури Thuja occidentalis L. під час розмноження in vitro: хімічні реактиви, якими виконували деконтамінацію вихідних експлантів, їх концентрації та комбінації. Протестовано низку схем виконання деконтамінації експлантів досліджуваного виду із застосуванням одного хімічного агента та різних їх комбінацій. Визначено оптимальну схему проведення ступінчастої стерилізації вихідних експлантів Thuja occidentalis L. для розмноження in vitro, яка забезпечила вихід 87,67±1,00 % життєздатного рослинного матеріалу і полягає у почерговому його обробітку такими хімічними агентами: С2Н5ОН (96 %; 5 с) + Н2О з детергентом (6 год) + Н2О2 (3 %; 10 хв) + С2Н5ОН (70 %; 5 с) + AgNO3 (0,2 %; 10 хв) + HgCl2 (1 %; 10 хв). Узагальнено та проаналізовано отримані результати