Der langeanhaltende Effekt von INF-, TNF- und IL-1 auf die IDO-1 Aktivität in humanen parodontalen Ligamentzellen.

Zusammenfassung Einführung: Parodontitis ist neben der Karies die häufigste Ursache des Zahnverlusts, es handelt sich dabei um einen entzündlichen Prozess, an dem eine Vielzahl von Zellen beteiligt sind. Einer der wichtigsten Zellen ist die Periodontalligament Stammzelle (hPDLSC), die eine Rolle in Immunmodulation durch Expression der Entzündungsmediatoren, wie z.B. Indolamin-2,3-dioxygenase (IDO1) spielt, besonders wenn sie mit INF- aber auch TNF- und IL-1 stimuliert werden. IDO-1 baut L-Tryptophan zu L-Formylkynurenin ab, welches zu L-Kynurenin hydroxyliert wird, deshalb spielt sie eine wichtige Rolle in der Immunmodulation, aber auch in Immunsuppression für z.B. Proliferation der T-Zellen. Zielsetzung: Ziel unsere Studie war es, den potentiellen langanhaltenden Effekt von INF-, TNF- und IL-1 auf die IDO1 Aktivität in hPDLSCs zu untersuchen. Materialien und Methoden: Primäre humane parodontale Ligamentzellen wurden von verschiedenen gesunden Probanden isoliert. Die Zellen wurden mit einer Dichte von 250,000 Zellen pro Well in 6-Well-Platten angesetzt. Nach 24 Stunden Inkubation wurden die Zellen mit INF-, TNF- und IL-1 für 48 Stunden stimuliert. Die IDO1 Aktivität wurde in konditioniertem Medium und den Zelllysaten mittels Messung der L-Kynurenin Konzentration bestimmt und auf die Gesamtproteinmenge und der Inkubationszeit normalisiert. IDO1 Aktivitäten wurden am TagAbstract Introduction: Periodontitis is the most common cause of tooth loss besides caries and is an inflammatory process involving multiple cells. One of the most important cells is the periodontal ligament cell, which plays a role in immunomodulation by expression of the inflammatory mediators, as indoleamine- 2,3- dioxygenases 1 (IDO-1), especially when stimulated with INF- but also TNF- and IL-1. IDO-1 degrades L-tryptophan to L-formylkynurenine, which is hydroxylated to L-kynurenine, therefore it plays an important role in immunomodulation, but also in immunosuppression for e.g. proliferation of T cells. Objective: Aim of our study was to investigate the potential long-lasting effect of INF- , TNF- and IL-1 on IDO-1 activity in hPDLSCs. Materials and Methods: Primary human periodontal ligament cells were isolated from several healthy volunteers. The cells were seeded at a density of 250,000 cells per well in 6-well plates. After 24 hours of incubation, the cells were stimulated with INF- , TNF- and IL-1 for 48 hours. The IDO-1 activity was determined in conditioned medium and cell lysates by measuring the L-kynurenine concentration and normalized to the total protein amount and the incubation time. IDO-1 activities were measured on dayParalleltitel laut Übersetzung des VerfassersMedizinische Universität Wien, Diplomarbeit, 2019(VLID)361600